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一、類器官是什么

類器官（Organoids）是一種在體外三維（3D）環(huán)境中培養(yǎng)的細(xì)胞簇集合，這些細(xì)胞簇能自組織并分化成具有與體內(nèi)器官相似的結(jié)構(gòu)和功能的微型模型。類器官技術(shù)的發(fā)展可以追溯到20世紀(jì)初，并經(jīng)歷了多個重要的發(fā)展階段。

早在1907年，H.V. Wilson 對分離的海綿細(xì)胞進(jìn)行研究，觀察到它們能自我組織并再生一個完整的有機(jī)體，H.V. Wilson（Herbert Vose Wilson）是一位美國海洋生物學(xué)家。

在19世紀(jì)末至20世紀(jì)初，科學(xué)界對于細(xì)胞是如何組成復(fù)雜多細(xì)胞生物的理解還處于起步階段。當(dāng)時的一個關(guān)鍵問題是，單個細(xì)胞是否能夠獨(dú)立生存并重新組合形成完整的生物體。海綿作為多孔的水生生物，由相對簡單的細(xì)胞組成，成為了研究這些問題的理想對象。

1907年，H.V. Wilson 進(jìn)行了一項(xiàng)具有里程碑意義的實(shí)驗(yàn)。他將海綿個體解離成了單個細(xì)胞，然后將這些細(xì)胞放在海水中，觀察它們的行為。Wilson 發(fā)現(xiàn)，當(dāng)這些單獨(dú)的海綿細(xì)胞被放在一起時，它們會自發(fā)地重新聚集，并最終重建出與原始海綿形態(tài)相似的結(jié)構(gòu)。這個實(shí)驗(yàn)的結(jié)果證明了單個細(xì)胞具有記憶其原始組織結(jié)構(gòu)的信息，并且能夠與其他細(xì)胞合作來重建復(fù)雜的生物體。這一發(fā)現(xiàn)挑戰(zhàn)了當(dāng)時的科學(xué)觀念，即認(rèn)為一旦細(xì)胞之間的聯(lián)系被破壞，就無法恢復(fù)原有的組織結(jié)構(gòu)。Wilson 的工作強(qiáng)調(diào)了細(xì)胞間通信和合作在多細(xì)胞生物發(fā)育中的重要性。Wilson 的實(shí)驗(yàn)激發(fā)了許多后續(xù)研究，包括對其他簡單多細(xì)胞生物（如海鞘和水螅）的細(xì)胞重組能力的研究。

1944年至1988年間，從兩棲動物原腎的體外培養(yǎng)到人類胚胎干細(xì)胞系的建立等多個重要的科研進(jìn)展，不僅證實(shí)了細(xì)胞的自我組織能力和維持分化狀態(tài)的潛力，還為后續(xù)的多能干細(xì)胞研究和類器官技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

二、重要的節(jié)點(diǎn)——iPSCs

時間來到2006年，日本的山中伸彌（Shinya Yamanaka）團(tuán)隊(duì)報告了從成年小鼠皮膚纖維母細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（Induced Pluripotent Stem Cells, iPSCs）。這項(xiàng)研究的成果迅速引起了全球科學(xué)界的關(guān)注，并在隨后幾年內(nèi)引發(fā)了大量相關(guān)研究。2012年，山中伸彌因此項(xiàng)成就與英國科學(xué)家約翰·戈登（John Gurdon）共同獲得了諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。

在2006年之前，科學(xué)家們普遍認(rèn)為，一旦細(xì)胞完成了分化過程，就無法再回到未分化的狀態(tài)。這意味著，成年人體內(nèi)的細(xì)胞，比如皮膚細(xì)胞，已經(jīng)失去了變成其他類型細(xì)胞的能力。但是，如果能夠找到一種方法讓這些已經(jīng)分化的細(xì)胞“回退”，那么就可以為治療各種疾病提供無限的可能性。而故事的主角——山中伸彌（Shinya Yamanaka），一名干細(xì)胞研究專家，他的研究改變了我們對細(xì)胞可塑性的理解，并為再生醫(yī)學(xué)開辟了新的道路。2006年，他和他的團(tuán)隊(duì)發(fā)表了一篇劃時代的研究論文，展示了如何將成年小鼠的皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)換為具有類似胚胎干細(xì)胞特性的細(xì)胞，這些細(xì)胞被稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）。

他們選擇了24個已知與胚胎干細(xì)胞特性相關(guān)的基因，試圖找出哪些基因能夠使成熟的細(xì)胞恢復(fù)到未分化狀態(tài)。通過使用逆轉(zhuǎn)錄病毒作為載體，將這些基因?qū)氲匠赡晷∈蟮钠つw纖維母細(xì)胞中。經(jīng)過一系列的實(shí)驗(yàn)和篩選，他們發(fā)現(xiàn)只有四個基因——Oct3/4、Sox2、c-Myc 和 Klf4——足以將成年細(xì)胞重編程為多能干細(xì)胞。這些被重編程的細(xì)胞表現(xiàn)出與胚胎干細(xì)胞非常相似的特征，例如能夠自我更新并且具有分化成身體內(nèi)所有細(xì)胞類型的能力。山中伸彌將這些細(xì)胞命名為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）。這一發(fā)現(xiàn)不僅證明了細(xì)胞的命運(yùn)是可以被逆轉(zhuǎn)的，而且提供了一種無需使用胚胎就能獲得多能干細(xì)胞的方法，從而避開了與使用胚胎干細(xì)胞相關(guān)的倫理爭議。

三、里程碑——腸道類器官

而真正標(biāo)志著類器官研究時代開始的事件，是2009年Hans Clevers 教授團(tuán)隊(duì)使用來自小鼠腸道的成體干細(xì)胞培育出了shou個腸道類器官。在Hans Clevers之間，科研人員已經(jīng)能夠利用胚胎干細(xì)胞或誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSCs）培育出一些簡單的組織結(jié)構(gòu)，但對于如何使用成體干細(xì)胞在體外構(gòu)建復(fù)雜的三維組織結(jié)構(gòu)了解甚少。

腸道是一個高度再生的器官，每幾天就會更新一次，因此成為研究細(xì)胞再生機(jī)制的理想模型。腸道內(nèi)部有一層單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的隱窩-絨毛結(jié)構(gòu)，其中含有負(fù)責(zé)細(xì)胞再生的干細(xì)胞。Hans Clevers團(tuán)隊(duì)首先從成年小鼠的腸道隱窩中分離出了干細(xì)胞。為了促進(jìn)這些干細(xì)胞的增殖和分化，他們設(shè)計(jì)了一種特殊的三維培養(yǎng)系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含了模擬腸道微環(huán)境的基質(zhì)成分和必要的生長因子。這些條件能夠支持干細(xì)胞在體外形成類似于腸道隱窩-絨毛結(jié)構(gòu)的小型組織團(tuán)塊，即所謂的“類器官”。通過這種方法，Hans Clevers 團(tuán)隊(duì)成功地培育出了能夠自我組織并分化成包含所有主要腸道細(xì)胞類型（包括吸收細(xì)胞、分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等）的腸道類器官。這些類器官不僅在形態(tài)上與真實(shí)的腸道組織相似，而且在功能上也表現(xiàn)出了類似的特性，例如能夠響應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)和分泌消化酶。這一科學(xué)發(fā)現(xiàn)證明了使用成體干細(xì)胞在體外構(gòu)建功能性組織結(jié)構(gòu)的可能性，為研究器官發(fā)育、疾病建模和藥物篩選提供了新的平臺。腸道類器官的成功培育也為研究腸道疾?。ㄈ缪装Y性腸病和腸癌）的發(fā)病機(jī)制提供了有力工具，并為開發(fā)新的治療方法鋪平了道路。

四、類器官培養(yǎng)方法

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★   培養(yǎng)成功率高；

★   體外持續(xù)擴(kuò)增；

★   保持腫瘤特征；

★   藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近。