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多地PCR實驗室“假陽性”曝光，如何應(yīng)對當(dāng)下困局？
近期不斷發(fā)生的幾起核酸檢測“假陽性"事件，對于奮戰(zhàn)在抗疫前線核酸檢測人員而言，除了應(yīng)對大規(guī)模、巨量的“新冠"樣本檢測任務(wù)外，應(yīng)該警惕核酸檢測中的“異常"情況。
PCR技術(shù)具有靈敏度高、特異性好的優(yōu)點，病毒檢測的“金標(biāo)準(zhǔn)"正是PCR核酸檢測技術(shù)。但 PCR 技術(shù)的高靈敏度也有優(yōu)劣，理論上一個核酸分子的污染都有可能引起結(jié)果的假陽性。而核酸檢測工作環(huán)節(jié)繁復(fù)，在采樣和檢測環(huán)節(jié)，均存在引發(fā)“假陽性"樣本出現(xiàn)的可能性，其中實驗室環(huán)節(jié)是形成“假陽性"的主要風(fēng)險點。
根據(jù)PCR檢測流程，一份樣本從進入實驗室到出結(jié)果，需要經(jīng)過標(biāo)本前處理、核酸提取、試劑配制、加樣、上機擴增、結(jié)果分析等多個環(huán)節(jié)，每一個環(huán)節(jié)處理不慎都會導(dǎo)致結(jié)果“假陽性"。
首先是標(biāo)本間交叉污染。如收集標(biāo)本的采樣管被污染；采樣管在開蓋時，形成的病毒氣溶膠導(dǎo)致的樣本間污染；核酸提取過程中，移液器或槍頭的污染。
其次是陽性質(zhì)控污染。從核酸提取到擴增的過程中，每板檢測都會有陰性和陽性質(zhì)控品，如操作不慎，陽性質(zhì)控也可能會污染樣本；
另外有儀器、試劑或耗材的原因。核酸檢測儀器一直處于滿負(fù)荷、連續(xù)工作狀態(tài)，勢必會影響升降溫過程，或是個別試劑存在非特異性擴增現(xiàn)象，或是PCR板封膜不嚴(yán)，PCR管在加熱過程中出現(xiàn)融化、體積變化、漏蓋等情況，都有可能導(dǎo)致PCR擴增曲線出現(xiàn)“翹尾"現(xiàn)象甚至假陽性。
然而，最令PCR實驗室頭疼，或是核酸檢測人員“談虎色變"的是氣溶膠污染。PCR實驗室中，陽性標(biāo)本或陽性質(zhì)控的擴增產(chǎn)物若處理不當(dāng)、實驗室管理不善、操作不夠規(guī)范，極易形成PCR產(chǎn)物氣溶膠，而污染實驗環(huán)境從而出現(xiàn)假陽性，且短期內(nèi)很難清除。這一問題表面上可通過更換不同的試劑予以解決，但目前新冠試劑大多都采用相同的引物探針序列，擴增區(qū)域大同小異，因此實際上也不能很好地解決擴增產(chǎn)物污染問題。所以實驗室除了配備不同擴增片段的復(fù)檢試劑外，如何規(guī)范地做好日常維護，有效預(yù)防或清除氣溶膠污染就顯得尤為重要，應(yīng)該是日常核酸檢測中的“重中之重"。
02、核酸氣溶膠污染傳統(tǒng)解決方案
傳統(tǒng)核酸氣溶膠污染解決辦法通常主要使用商品化DNA去除劑，并輔以紫外燈照射，甚至是實驗室空置、通風(fēng)等手段。商品化的DNA去除劑，通常通過手持噴壺，在空氣中噴灑清除劑，清除氣溶膠效果有限，同時還有抑制后續(xù)PCR擴增的風(fēng)險；常規(guī)的紫外燈照射，對大片段的核酸氣溶膠可能會有效，但對小于300bp的PCR擴增產(chǎn)物來說，效果不明顯；在常態(tài)化核酸檢測的背景下，大多PCR實驗室都是滿負(fù)荷運轉(zhuǎn)，通過空置和通風(fēng)來解決氣溶膠污染也不現(xiàn)實。
03、核酸氣溶膠污染傳統(tǒng)解決方案
熠創(chuàng)鼎惠（上海）生物科技有限公司致力于為PCR實驗室提供高效安全的核酸氣溶膠污染解決方案，改變“手工清除并等待，實現(xiàn)“智能清除即檢測"，PCR實驗室變革創(chuàng)新核酸氣溶膠清除方法，降低實驗室PCR氣溶膠污染概率并杜絕污染擴散的發(fā)生。
Ares系列核酸氣溶膠污染清除儀搭載工業(yè)級分散系統(tǒng)，將核酸氣溶膠清除劑轉(zhuǎn)化為干霧狀態(tài)的氣溶膠清除因子。通過剪切霧化作用，加強霧化清除因子的清除能力，充分捕捉PCR氣溶膠，并通過鏈?zhǔn)交瘜W(xué)反應(yīng)破壞核酸分子的共軛雙鍵，繼而通過光觸媒反應(yīng)，進一步降解PCR氣溶膠，同時，通過氣溶膠吸附屏物理吸附“漏網(wǎng)"的氣溶膠，達到多維度高效清除擴增產(chǎn)物污染的效果。