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多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的操作步驟介紹
閱讀：1592 發(fā)布時(shí)間：2023-3-13
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板是一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室用品，通過(guò)其多孔的表面可以讓細(xì)胞黏附并生長(zhǎng)，通常用于細(xì)胞的分離、擴(kuò)增和實(shí)驗(yàn)室研究等方面。
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的作用：
1.可以用于細(xì)胞分離和單克隆細(xì)胞的制備；
2.可以用于細(xì)胞擴(kuò)增和培養(yǎng)；
3.可以用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和研究，如細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化和凋亡等。
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板的操作步驟：
1．加樣品：將標(biāo)本稀釋液100ul（或2滴）加到包被板內(nèi)（預(yù)留陰陽(yáng)性及空白對(duì)照2－5孔），將待檢血清用PBS或生理鹽水按1：20稀釋后取10ul加入反應(yīng)孔內(nèi)。
2．加對(duì)照：加入陰性對(duì)照1－3孔，陽(yáng)性對(duì)照1孔，各100ul對(duì)照血清。空白對(duì)照1孔空置。
3．溫育：將反應(yīng)板震蕩使樣品混勻后，置37℃溫箱或水浴反應(yīng)20分鐘。
4．洗板：用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。（1）手洗：將反應(yīng)板孔內(nèi)容物傾出，將洗滌液注滿反應(yīng)孔，放置30秒鐘后用力甩去，如此重復(fù)5次后拍干。（2）機(jī)洗：5次，每孔注入洗滌液200ul或注滿，停留30秒鐘后吸盡拍干。
5．加酶標(biāo)工作液：每孔加入100ul（或2滴）酶標(biāo)工作液，置37℃溫箱反應(yīng)20分鐘后，洗板5次，洗板操作同步驟4。
6．顯色和終止反應(yīng)：將底物A、B液各50ul（或1滴）加到反應(yīng)孔內(nèi)，37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul（或1滴）混勻終止反應(yīng)。