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訪問次數(shù):172更新時間:2023-06-10 11:12:06
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 食品,農(nóng)業(yè) |
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一、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒
通用名:豬圓環(huán)病毒Ⅱ型IgG抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Porcinecircovirus (ELISA)
二、包裝規(guī)格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途 用于檢測豬血清中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(Porcinecircovirus,PCV2)抗體。評估豬場豬圓環(huán)苗免疫狀況,感染豬的血清學診斷。
四、試劑盒原理
檢測試劑盒系由預包被豬圓環(huán)病毒Ⅱ型重組cap蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,則將與酶標板上抗原結合,經(jīng)洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合;再經(jīng)洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體。
五、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體檢測試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘。
5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照的平均OD值即ODNC應≤0.3,陽性對照的平均OD值即ODPC應≥0.6。
【檢驗結果的判定】
1.樣品的OD值即ODS;
2.閾值計算:SP值=(ODS-ODNC)/(ODPC-ODNC);
SP值≥0.2,結果判定為陽性;SP值<0.2,結果判定為陰性。
3.本實驗結果為陰性時表明豬只抗體水平不足,建議補打相應疫苗。
【試驗方法的局限性】
該試驗僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬圓環(huán)病毒Ⅱ型抗體,根據(jù)SP值高低可作抗體水平強、中、弱的粗略評估。
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,使用時需恢復至室溫以完全溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。