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鏈霉親和素磁珠 | Streptavidin Magnetic Beads | MedChemExpress (MCE)

閱讀:286      發(fā)布時(shí)間:2024-7-17
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鏈霉親和素磁珠

MCE 國際站:Streptavidin Magnetic Beads

品牌:MedChemExpress (MCE)

存儲(chǔ)條件:4°C,1 年

簡(jiǎn)介:Streptavidin Magnetic Beads 用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測(cè)。

概述:MCE Streptavidin Magnetic Beads 使用納米表面生物技術(shù)將重組中性鏈霉親和素共價(jià)偶聯(lián)到超順磁性磁珠微球表面,形成單分子固定層,可用于生物素化核酸、生物素化抗體或其他生物素化配體和靶分子的分離和檢測(cè)。由于具有單層的鏈霉親和素,其表面的絕大多數(shù)生物素結(jié)合位點(diǎn)在空間上不僅可以結(jié)合游離生物素,而且還可以結(jié)合生物素化的配體/靶標(biāo),使用簡(jiǎn)單有效。形狀確定的特異性表面便于進(jìn)行高效捕獲、分離和下游操作,可保證批次一致性和結(jié)果的可重復(fù)性。MCE Streptavidin Magnetic Beads 是以聚合物為基材的實(shí)心磁珠微球,主要用于免疫檢測(cè)、免疫沉淀、分離核酸、細(xì)胞分選等。

描述:

MCE 鏈霉親和素磁珠使用重組鏈霉親和素共價(jià)結(jié)合到順磁珠表面。鏈霉親和素沒有碳水化合物基團(tuán),與親和素不同,可確保低非特異性結(jié)合。由于鏈霉親和素和生物素之間的高親和力,生物素化的分子(例如肽、蛋白質(zhì)、抗體、糖、凝集素、寡核苷酸、DNA/RNA)可與磁珠結(jié)合。 MCE 鏈霉親和素磁珠可通過磁力架手動(dòng)從溶液中取出,或使用儀器自動(dòng)取出。


•   高結(jié)合能力。

•   低非特異性結(jié)合。

•   樣品損失最小。

•   即用型。


操作說明:1. 固定化核酸(1) 將磁珠充分混懸,可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒,取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中,置于磁力架,磁性分離,棄上清液。注意:用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量,參考磁珠的載量,計(jì)算需取用的磁珠體積,建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍,使磁珠結(jié)合飽和。(2)加入1 mL Wash Buffer I,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。(3) 加入 500 μL 用 Wash Buffer I 稀釋的生物素化核酸(使磁珠濃度為 2 mg/mL),充分振蕩混懸,置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育(室溫, 30 分鐘;4°C, 2 小時(shí))。(4) 磁性分離,將上清液移至新的 EP 管中,以備后續(xù)使用。(5)加入1 mL Wash Buffer I,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。注意:可通過測(cè)定反應(yīng)前后核酸的濃度,計(jì)算結(jié)合到磁珠上的核酸量。2. 固定化抗體/蛋白:(1) 將磁珠充分混懸,可置于混合器上渦旋振蕩 20 秒,取 100 μL 磁珠到新的 1.5 mL EP 管中,置于磁力架,磁性分離,棄上清液。注意:用戶可根據(jù)生物素化分子的使用量,參考磁珠的載量,計(jì)算需取用的磁珠體積,建議生物素化分子的加入量為磁珠載量的 1-2 倍,使磁珠結(jié)合飽和。(2)加入1 mL Wash Buffer II,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟1次。(3) 加入 1 mL 用 Wash Buffer II 稀釋的生物素化抗體/蛋白(使磁珠濃度為1 mg/mL),充分振蕩混懸,置于旋轉(zhuǎn)混合儀上旋轉(zhuǎn)孵育(室溫, 60 分鐘;4°C, 4 小時(shí))。(4) 磁性分離,將上清液移至新的 EP 管中,以備后續(xù)使用。(5)加入1 mL Wash Buffer II,充分洗滌磁珠。磁珠洗滌過程:加入對(duì)應(yīng)的buffer到EP 管中,蓋上管蓋,渦旋振蕩磁珠15秒,磁性分離,棄上清。重復(fù)以上步驟4次。3. 洗脫3.1 生物素標(biāo)記核酸的洗脫步驟:向磁珠中加入 50-100 μL Elution BufferⅠ,65°C 孵育 5 分鐘或 90°C 孵育 2 分鐘,置于磁力架,磁性分離,收集上清。3.2 生物素標(biāo)記抗體/蛋白的洗脫本說明書提供以下兩種洗脫方案,操作者可根據(jù)后期檢測(cè)的需要選擇不同的洗脫方法。a. 變性洗脫法:此方法洗脫的樣品適用于 SDS–PAGE 檢測(cè)。步驟:向磁珠中加入 50–100 μL 1 × SDS-PAGE Loading Buffer 混合均勻, 95°C 加熱 5 分鐘。置于磁力架,分離磁珠,收集上清,進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測(cè)。注:如果選擇變性洗脫,那么洗脫液將包含鏈霉親和素單體和聚體、生物素標(biāo)記抗體或蛋白b. 非變性洗脫法:此方法洗脫的樣品保持原有的生物活性,可用于后期功能分析。步驟:向磁珠中 50–100 μL Elution Buffer Ⅱ,室溫孵育 5–10 分鐘。置于磁力架,分離磁珠,收集上清至新的 EP 管,并立即滴入總體積 1/10 體積的中和緩沖液 (0.1 M NaOH),將洗脫產(chǎn)物 pH 調(diào)節(jié)至中性,樣品用于后期功能分析。注:如果選擇非變性洗脫,酸性條件下鏈霉親和素可能會(huì)脫落,需注意孵育時(shí)間不要超過 10 分鐘;酸性洗脫液能破壞大部分的抗體與抗原的相互作用,但為了更好的洗脫效果,可預(yù)先用 1 mL 0.1% Tween-20 的水溶液洗滌磁珠 1 次。

注意事項(xiàng):1. 本產(chǎn)品 pH 值為 6-8,禁止凍結(jié)。2. 本產(chǎn)品應(yīng)避免離心、干燥或凍存,禁止長(zhǎng)時(shí)間置于磁場(chǎng),可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán),降低結(jié)合活性。3. 從磁珠保存管中移取磁珠前應(yīng)充分振蕩混勻,操作過程中動(dòng)作應(yīng)輕柔,并避免產(chǎn)生氣泡。4. 生物素化樣品準(zhǔn)備過程中,在生物素標(biāo)記好蛋白或核酸后,用脫鹽柱去掉多余的游離生物素。5. 為最大限度的降低蛋白質(zhì)降解,請(qǐng)配合使用 MCE 蛋白酶抑制劑 cocktails (MCE 產(chǎn)品目錄號(hào):HY-K0010,HY-K0011)。6. 生物素化分子的大小會(huì)影響磁珠的載量,用戶需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)確定磁珠對(duì)特定生物素化分子的載量。7. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。8. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品:Estrone sulfate (sodium)  | Rhodamine Phalloidin  | Methylprednisolone  | Fumonisin B1  | NCT-503  | Brusatol  | Sodium dichloroacetate  | Thymidine  | Alirocumab  | VD2-d3

Trending products:Recombinant Proteins  |  Bioactive Screening Libraries  |  Natural Products  |  Dye Reagents  |  PROTAC  |  Isotope-Labeled Compounds



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