潮霉素 B 無(wú)菌溶液
MCE 國(guó)際站:Hygromycin B, Sterile
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲(chǔ)條件:4°C 保存 2 年
簡(jiǎn)介:MCE Hygromycin B, Sterile 是一種氨基糖苷類抗生素,主要通過(guò)干擾 70S 核糖體易位和誘導(dǎo)對(duì) mRNA 模板的錯(cuò)讀而抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的正常合成,從而導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞死亡。
概述:MCE 即用型潮霉素 B 無(wú)菌溶液,已過(guò)濾除菌,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。潮霉素B 來(lái)源于吸水鏈霉菌(Streptomyces hygroscopicus),是一種氨基糖苷類抗生素,主要通過(guò)干擾 70S 核糖體易位和誘導(dǎo)對(duì) mRNA 模板的錯(cuò)讀而抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的正常合成,從而導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞死亡。大腸桿菌(Escherichia coli)來(lái)源的潮霉素抗性基因(hyg 或 hph),編碼潮霉素 B 磷酸轉(zhuǎn)移酶,可將潮霉素 B 轉(zhuǎn)化成磷酸化產(chǎn)物,使其失去生物活性。因此,潮霉素 B 可用于篩選、維持培養(yǎng)成功轉(zhuǎn)染了潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞
描述:
潮霉素B是從吸水鏈霉菌中純化得到的氨基糖苷類抗生素,通過(guò)與細(xì)菌核糖體的70S亞基結(jié)合,抑制蛋白質(zhì)合成,導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞死亡。
對(duì)潮霉素B的抗性是由大腸桿菌潮霉素抗性基因(hyg或hph)賦予的,因此,潮霉素B可用于篩選和維持轉(zhuǎn)染了潮霉素抗性基因的原核和真核細(xì)胞。低純度的潮霉素可引起不同的毒性作用,因此在實(shí)驗(yàn)中掌握其純度至關(guān)重要。
操作說(shuō)明:1. 潮霉素 B 溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞 50-1000 μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞 20-200 μg/mL;真菌 300-1000 μg/mL。2. 對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve,即劑量效應(yīng)曲線),來(lái)確定最佳篩選濃度:1)以 20-25% 的細(xì)胞密度進(jìn)行鋪板,鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn),37°C 培養(yǎng)過(guò)夜。2)準(zhǔn)備含梯度濃度潮霉素 B 的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基,至少 5 個(gè)梯度。以哺乳動(dòng)物為例,常用濃度為 50-1000 μg/mL,可設(shè)定 50、100、250、500、750、1000 μg/mL 六個(gè)濃度。3)細(xì)胞過(guò)夜培養(yǎng)后,使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基,孵育細(xì)胞。每個(gè)濃度做 3 個(gè)平行對(duì)照。4)約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。5)每日監(jiān)測(cè)細(xì)胞,觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度。
注意事項(xiàng):1. 注意無(wú)菌操作,避免污染。2. 本產(chǎn)品的工作濃度是針對(duì)含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基而設(shè)定的,在無(wú)血清培養(yǎng)基中使用時(shí)應(yīng)適當(dāng)減少用量,以免造成細(xì)胞毒性。3. 本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療。5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品:S-Gboxin | BV6 | Saquinavir (mesylate) | CGP37157 | N-Methylpyrrolidone | Lamotrigine | Quinine | Boc-Gln-Ala-Arg-AMC (acetate) | Faropenem sodium | Metyrapone
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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