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G418 選擇性抗生素?zé)o菌溶液

MCE 國際站：G418 Selective Antibiotic, Sterile

品牌：MedChemExpress (MCE)

存儲條件： -20°C 保存 2 年

簡介：MCE G418 Selective Antibiotic, Sterile 是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過影響 80S 核糖體的功能來干擾蛋白質(zhì)的合成，對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞等均有毒性。

概述：MCE G418 選擇性抗生素，滅菌（G418 Selective Antibiotic, sterile）是已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)的溶液。G418 選擇性抗生素是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過影響 80S 核糖體的功能來干擾蛋白質(zhì)的合成，對細(xì)菌、酵母、高等植物、哺乳動物細(xì)胞等均有毒性。G418 抗性基因（neo gene）位于轉(zhuǎn)座子 Tn5 或 Tn601 (903)。在 Tn5 上成為氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 3 (II) 或 APH (3) II，而在 Tn601 上則成為氨基糖苷激酶 3 (I) 或APH (3) I。這些基因來源于細(xì)菌，但也可以在真核細(xì)胞中表達(dá)。將任一抗性基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得 G-418 抗性，從而用來篩選和維持培養(yǎng)攜帶抗性基因的原核或者真核細(xì)胞。

描述：

G418 選擇性抗生素是由紅花小單孢菌產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素。它通過與細(xì)菌核糖體的 80S 亞基結(jié)合而起作用，從而抑制原核和真核細(xì)胞中的蛋白質(zhì)合成。

對 G418 選擇性抗生素的抗性是由大腸桿菌 APH (3) I 和 APH (3) II 抗性基因賦予的。該基因在 Tn5 上變?yōu)?APH (3) II，在 Tn601 上變?yōu)?APH (3) I。因此，G-418 選擇性抗生素可用于選擇和維持?jǐn)y帶 G418 抗性基因的原核或真核細(xì)胞。

操作說明：1. G418 選擇性抗生素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）來確定最佳篩選濃度：1）以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板，鋪足夠量的孔以進(jìn)行后續(xù)的梯度實驗，37℃ 培養(yǎng)過夜。2）準(zhǔn)備含梯度濃度 G418 選擇性抗生素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。以哺乳動物為例，常用濃度為 50-1000 μg/mL，可設(shè)定 0、50、100、200、400、800、1000 μg/mL。3）細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細(xì)胞。每個濃度做 3 個平行對照。4）約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。5）每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度

注意事項：1. 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù)，以免效價降低。2. 注意無菌操作，避免污染。3. 本產(chǎn)品的工作濃度是針對含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基而設(shè)定的，在無血清培養(yǎng)基中使用時應(yīng)適當(dāng)減少用量，以免造成細(xì)胞毒性。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療。5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

銷售產(chǎn)品：CD1530  | GW 441756  | Nelarabine  | Nitro blue tetrazolium chloride  | Oseltamivir  | Dracorhodin perchlorate  | Fluvastatin (sodium)  | Istaroxime (hydrochloride)  | Methylprednisolone succinate  | Canagliflozin (hemihydrate)

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