化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
TissueLyser II自動化樣品破碎
用于中到高通量樣本破碎，適用于分子分析
- 破碎過程便利、安全
- 適配器專為高通量破碎而優(yōu)化
- 提供多種配件
- 確保難裂解組織獲得高重復性結果
- QIAGEN樣本處理體系的重要組成部分
通過不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠在塑料樣品管中的高速震動，TissueLyser II可同步破碎多個生物樣本。借助適當?shù)倪m配器，可同時處理48或192個樣本。也可使用研磨罐處理大體積樣本。同時提供各種研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管蓋。TissueLyser II包括適配器在內的所有配件與TissueLyser（已停產）兼容。
可靠檢測miRNA。
將大鼠腎臟置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，使用TissueLyser II，在QIAzol Lysis Reagent中25 Hz破碎25 mg樣本2 x 5分鐘。使用miRNeasy Mini Kit，采用手動步驟 (Manual) 或在QIAcube全自動核酸純化儀 (QIAcube) 上進行自動化處理，純化包含miRNA的總RNA。使用miScript System進行Real-time RT-PCR，檢測2種不同的miRNA——miR-16和miR-25。
高效破碎動物組織。
冷凍 (Frozen) 組織 (20 mg) 或將其置于RNAlater RNA Stabilization Reagent (RNAlater) 中穩(wěn)定，然后使用TissueLyser II破碎 (肝臟和肌肉破碎2 x 2分鐘；皮膚破碎2 x 5分鐘)。使用RNeasy Mini Kit (肝臟)、RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (肌肉) 純化RNA。[A] 采用1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠分析顯示了清晰的核糖體RNA條帶，表示具有完整的RNA。[B] 利用A260 nm吸光度測量，定量RNA產量。
從植物組織中純化RNA具有可重復性。
使用TissueLyser II破碎冷凍的植物葉子 (2 x 1分鐘)。使用RNeasy Plant Mini Kit純化RNA，并在1.2 %的甲醛瓊脂糖凝膠上進行分析。核糖體RNA條帶清晰均勻，表示可重復純化出完整的RNA。T：番茄 (100 mg)；A：擬南芥 (25 mg)；C：棉花 (100 mg)；M：玉米 (100 mg)；R：油菜 (100 mg)。
從動物組織中純化DNA，具有可重復性。
將一只大鼠的心臟切成96 x 25 mg的小塊，然后使用TissueLyser II破碎 (2 x 15秒)。在QIAcube全自動核酸純化儀上使用DNeasy Blood & Tissue Kit (采用Reagent DXzui大程度減少裂解起泡現(xiàn)象) 進行自動DNA純化。48個樣本的瓊脂糖凝膠分析顯示了各樣本中的DNA量*。M：分子量標準。
從動物組織中純化完整的蛋白。
將組織樣本(50 mg) 置于Mammalian Cell Lysis Buffer中預冷至4°C，使用TissueLyser II 20 Hz破碎3 x 90秒。使用針對∝-tubulin、β-actin和GAPDH的抗體對裂解物 (15 μg) 進行western印跡分析。同時分析純化的蛋白質 (1 μg、100 ng和10 ng)，作為陽性對照。Lu：肺；He：心臟；Sp：脾；Li；肝；Ki：腎；Br：腦；Th：胸腺。
從革蘭氏陽性菌中純化RNA，具有可重復性。
使用RNAprotect Bacteria Reagent穩(wěn)定B. subtilis培養(yǎng)物。使用TissueLyser II，在裂解緩沖液中30 Hz破碎單個樣本 (各2.5 x 108個細胞) 5分鐘。使用RNeasy Protect Bacteria Mini Kit純化總RNA，并在甲醛瓊脂糖凝膠上進行分析。
TissueLyser II.
Performance
TissueLyser II尤其適合高通量的樣本破碎，適用于人類、動物和植物組織、細菌和酵母。可純化獲得高品質的DNA、RNA、miRNA和蛋白質，甚至對于難裂解的組織也具有高度的可重復性（參見"Efficient disruption of animal tissues"、"Reproducible RNA purification from plant tissues"、"Reproducible DNA purification from animal tissue"、"Purification of intact protein from animal tissue"、"Reproducible RNA purification from Gram-positive bacteria"和"Reliable detection of miRNAs"）。
Principle
基因分型、基因表達分析和蛋白質組學研究均要求對生物樣本進行高效破碎，以確保獲得高產的DNA、RNA和蛋白質。TissueLyser II體系通過研磨珠的高速震蕩來實現(xiàn)對樣本的有效破碎。TissueLyser II可快速、*的破碎樣本，*釋放生物分子，并可同時對樣本進行勻，協(xié)助后續(xù)使用的QIAGEN試劑盒進行純化（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。
QIAGEN提供從樣本收集到DNA、RNA和蛋白質純化的完整解決方案，TissueLyser II是其中關鍵的組成部分。TissueLyser II可作為QIAsymphony SP等QIAGEN自動化儀器高通量制備和分析樣本的補充（參見"QIAGEN high-throughput automation"）。這一即用型儀器可從1–96個樣本中自動純化DNA、RNA和蛋白質。TissueLyser II也適用于QIAGEN手動樣本制備試劑盒（參見"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。
進行RNA研究時，新鮮收集的組織可在RNAlater RNA Stabilization Reagent中穩(wěn)定，可有效避免操作過程中RNA的降解。對于需要純化DNA、 RNA和蛋白質的應用，可使用Allprotect Tissue Reagent，將新鮮收集的組織中的待分析物迅速穩(wěn)定。
QIAGEN高通量自動化儀器 >
| 儀器 | 目的 | 通量 |
|---|---|---|
| QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀 | 純化DNA、RNA和蛋白質 | 每批1–96個樣本 |
| BioRobot Universal System | 純化DNA和RNA | 96孔板 |
| QIAxcel | 對DNA片段和RNA進行電泳分析 | 每批多達96個樣本 |
| QIAgility | 反應體系構建 | 每批多達384個樣本 |
| Rotor-Gene Q實時熒光定量PCR分析儀 | real-time PCR和HRM分析 | 每批多達100個樣本 |
| PyroMark Q96 MD or ID | 甲基化和突變分析 | 每批多達96個樣本 |
| 純化的被分析物 | 樣本類型 | QIAGEN試劑盒 |
|---|---|---|
| RNA | 容易裂解的組織 | RNeasy Kits |
| RNeasy Plus Kits | ||
| RNeasy Protect Kits | ||
| RNA | 富含纖維的組織 | RNeasy Fibrous Tissue Kits |
| RNA | 各種類型組織 | RNeasy Lipid Tissue Kits |
| RNeasy Universal Tissue Kits | ||
| RNA | 植物組織 | RNeasy Plant Mini Kit |
| RNA | 酵母 | RNeasy Kits |
| RNA | 細菌 | RNeasy Protect Bacteria Kits |
| microRNA | 各種類型組織 | miRNeasy Kits |
| DNA | 人類組織 | QIAamp DNA Kits |
| DNA | 動物組織 | DNeasy Blood & Tissue Kits |
| 蛋白質 | 組織 | Qproteome Mammalian Protein Prep Kit |
| 磷蛋白 | 組織 | PhosphoProtein Purification Kit |
| 糖蛋白 | 組織 | Qproteome Glycoprotein Kits |
| DNA和RNA | 組織 | AllPrep DNA/RNA Kits |
| DNA、RNA和蛋白質 | 組織 | AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit |
Procedure
TissueLyser Adapter Sets使用微型收集管，可處理多達2 x 96個樣本，或使用2 ml微型離心管，處理多達2 x 24個樣本。如果在樣本破碎過程中不使用裂解緩沖液，則需要將適配器置于–80°C環(huán)境中預冷。在破碎時樣品管需保持密封，以避免交叉污染，這對于real-time RT-PCR或芯片分析等高敏感性的下游應用尤其重要。根據(jù)樣本類型不同，破碎使用不銹鋼珠、碳化鎢珠或玻璃珠進行。TissueLyser Bead Dispensers用來方便的將單個珠子加入到離心管中，或同時將96個研磨珠加入到收集管中。TissueLyser II也可配合Grinding Jar Sets使用，破碎大體積樣本。
Applications
TissueLyser II自動化樣品破碎每批可處理多達192個樣本，因此是遺傳學、轉錄組學和蛋白質組學研究中獲得生物信息的理想解決方案。TissueLyser II是新一代高通量測序的shou選破碎儀器。TissueLyser II可與多種QIAGEN樣本純化試劑盒配套使用，樣本純化可以手動進行，也可以在QIAcube全自動核酸純化儀、QIAsymphony SP核酸提取純化分析儀、EZ1 Advanced、BioRobot或BioSprint工作站上自動進行。
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