重組蛋白技術(shù)具有哪些特點?
閱讀:832 發(fā)布時間:2023-9-6
重組蛋白(recombinant protein)是指應用重組 DNA 或重組 RNA 技術(shù)而獲得的蛋白質(zhì)。重組蛋白工程先應用基因克隆或化學合成技術(shù)獲得目的基因(gene of interest,GOI),連接到適合的表達載體,導入到特定的宿主細胞,利用宿主細胞的遺傳系統(tǒng),表達出有功能的蛋白質(zhì)分子。
重組蛋白的產(chǎn)生是應用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng):原核蛋白表達,哺乳動物細胞蛋白表達,酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產(chǎn)的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統(tǒng),提高表達成功率。
重組蛋白技術(shù)實現(xiàn)了人工控制和操縱生物體的基因表達與蛋白質(zhì)生產(chǎn)的過程。主要特點如下:
1.設(shè)計與產(chǎn)生人工合成或改造的DNA序列,編碼 researcher 想要的蛋白質(zhì)。
2.構(gòu)建表達載體,將設(shè)計的DNA序列插入到可在某宿主細胞中表達的載體上。
3.將構(gòu)建的表達載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染入宿主細胞,利用宿主轉(zhuǎn)錄翻譯系統(tǒng)表達重組蛋白質(zhì)。
4.從宿主細胞或培養(yǎng)上清中提取和純化重組蛋白質(zhì)。
5.對重組蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能進行鑒定,實現(xiàn)其生產(chǎn)與應用。
6.可以實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)和商業(yè)化生產(chǎn)重組治療性蛋白質(zhì)。
7.可以實現(xiàn)蛋白質(zhì)的定向進化與改造設(shè)計。
8.實現(xiàn)重要蛋白質(zhì)的高效生產(chǎn),有助于相關(guān)基礎(chǔ)與應用研究。