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液相色譜柱常見問題分析與解決方法

閱讀:556      發(fā)布時間:2023-7-5
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液相色譜柱的使用過程中,大家總是碰到這樣那樣的問題。今天給大家介紹幾個常見的問題及解決方法。

1.使用一段時間后柱壓過高:
解決方法:
首先查看是否HPLC系統(tǒng)原因,排除系統(tǒng)原因后,原因基本是由于實驗過程中雜質(zhì)在柱中的累積。盡量完善操作條件,做完樣品后要及時沖洗干凈,如緩沖鹽的流動相一定要用高比例的水溶液(如,90%)沖洗后再用有機相保存。

2.篩板堵塞與柱頭塌陷:
解決方法:
如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,小心取下篩板,用5%左右的硝酸溶液超聲處理20分鐘左右,再用純水超聲20分鐘左右,重新裝入色譜柱。

3.色譜柱頭的填料被樣品污染:
解決方法:
如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內(nèi)前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復(fù)后,重新安裝上柱頭螺絲。

4.色譜柱內(nèi)緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結(jié)晶析出:
解決方法:
如確定是鹽結(jié)晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內(nèi)鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。

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