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目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測(cè)試劑盒>> YS0555總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法)

總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法)
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參考價(jià) 198
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
198
≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 雅吉生物
  • 型號(hào) YS0555
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-10-31 20:23:54瀏覽次數(shù):315評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 120T
貨號(hào) YS0555 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法),雅吉生物是一家生物企業(yè)主營(yíng)ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒

總蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,對(duì)于生物體液(血清、尿液、腦脊液)中總蛋白質(zhì)含量的測(cè)定,一般要基于

如下兩個(gè)假設(shè):1、所有蛋白質(zhì)分子由純多肽組成,含氮量的質(zhì)量百分比為16%;2、體液中含有數(shù)百個(gè)蛋白質(zhì)分子,

每個(gè)分子對(duì)測(cè)定反應(yīng)都具有非常相似的特性,目前常用的檢測(cè)總蛋白的方法有:雙縮脲法、紫外分光光度法、染料結(jié)合法

、凱氏定氮法、沉淀法等。


總蛋白(雙縮脲比吸光度微板法)多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測(cè)定,雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在

的情況下,肽鍵與銅離子結(jié)合,生成藍(lán)紫色的化合物,此化合物在540nm的吸光度與肽鍵的數(shù)量呈正比例關(guān)系,

因此可計(jì)算出蛋白質(zhì)的含量,雙縮脲法測(cè)蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離

子螯合劑的影響,另外對(duì)于血清總蛋白的雙縮脲分析,脂類、血紅蛋白、葡聚糖具有一定干擾作用,

雙縮脲法在5~160mg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。




操作步驟(僅供參考):

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支,分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml。

2、靜脈采血1ml,立即取下針頭,沿管壁向各試管注入血液0.5ml,立即混勻并啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí),并置于37℃水浴中。

3、每隔10s輕搖試管一次,觀察管內(nèi)血液流動(dòng)情況,直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間,即為ACT。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值。


計(jì)算:參考區(qū)間: (1.77±0.76)min


4、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測(cè)血清、尿液等樣品,按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml,如果檢測(cè)組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml。

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注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮,如取材后不立即使用,應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,并蓋緊口。

3、TA滴定液為堿性溶液,有腐蝕性,請(qǐng)小心操作。

4、TA標(biāo)定液容易長(zhǎng)菌,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請(qǐng)棄用。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定。

6、TA滴定液含量計(jì)算公式中,V0最好為3次空白測(cè)定的平均值。

7、如果所測(cè)樣品的濃度過(guò)高,應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測(cè)定,并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8、如果樣品顏色較深,滴定終點(diǎn)不易觀察,應(yīng)采用電位滴定法。

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