目錄:武漢市灰藻生物科技有限公司>>質(zhì)粒載體>> HZB800186p3×FLAG-CMV-10質(zhì)粒載體
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 干粉(現(xiàn)貨),大提液體(一周) |
|---|---|---|---|
| 貨號 | HZB800186 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 蛋白表達 |
p3×FLAG-CMV-10質(zhì)粒載體
| 名稱 | p3×FLAG-CMV-10質(zhì)粒載體 |
| 特征特性 | 宿主:哺乳細(xì)胞,片段類型:ORF,片段物種:空載體,原核抗性:Amp,篩選標(biāo)記:Neo/G418,啟動子:CMV,復(fù)制子:pUC,感受態(tài):DH5a,溫度:37度,正向引物:CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG,反向引物:pFlag-CMV-R:GCACTGGAGTGGCAACTT |
| 主要用途 | 蛋白表達 |
| 使用方法 | 干粉質(zhì)粒：①收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl無菌水溶解質(zhì)粒，室溫放置1min；②從-80°C冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài)，置于冰盒上解凍，并做好標(biāo)記；③取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中，冰浴30min;④42°C熱激90s，再冰浴2min;⑤加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min;⑥6000rpm離心5min，僅留100μl上清混勻菌體沉淀；⑦混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上，倒入適量玻璃珠，涂勻液體；⑧將平板正向培養(yǎng)1h，再倒置培養(yǎng)12h～16h;⑨挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒。 注意：如果第二天轉(zhuǎn)化平板長的過多，請將質(zhì)粒按比例稀釋后再轉(zhuǎn)化。 |
| 規(guī)格 | 干粉(現(xiàn)貨)，大提液體(一周) |
| 保存說明 | ①干粉質(zhì)粒：90天，請盡快轉(zhuǎn)化。保存溫度：一般在-20°C，置于-80°C保存時間更長。②液體質(zhì)粒：存于-20℃，保質(zhì)期90天。③濾紙質(zhì)粒：存于-20度，保質(zhì)期90天，請務(wù)必先轉(zhuǎn)化提質(zhì)粒后使用。 |
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