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目錄:賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司>>蛋白純化>>蛋白提取>> NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑

NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑
  • NE-PER核蛋白-胞漿蛋白分離試劑
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ThermoScientificNE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法，用戶只需擁有臺(tái)式微量離心機(jī)、離心管和移液器，進(jìn)行簡(jiǎn)單的分步式細(xì)胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可
    Thermo Scientific NE-PER核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒提供了高效的核蛋白抽提方法，用戶只需擁有臺(tái)式微量離心機(jī)、離心管和移液器，進(jìn)行簡(jiǎn)單的分步式細(xì)胞裂解及核蛋白與胞漿蛋白離心分離即可。NE-PER 試劑盒能夠高效地將胞漿蛋白與核蛋白溶解和分離為不同組分，交叉污染以及基因組 DNA/mRNA 的干擾均降到了。一旦經(jīng)過(guò)脫鹽或稀釋，分離后的蛋白即可用于免疫分析和蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)，如遷移率分析(EMSA)、免疫共沉淀 (Co-IP) 和拉下實(shí)驗(yàn)。
     
    • 快速-2小時(shí)內(nèi)獲得胞核與胞漿內(nèi)的可溶性蛋白組分，交叉污染以及基因組DNA/mRNA的干擾均降到了
    • 可靠-超過(guò)“萬(wàn)篇"的文獻(xiàn)出鏡率，廣受科研工作者喜愛(ài)
    • 通用-培養(yǎng)細(xì)胞或者組織（新鮮樣本）
    • 高活性-獲得樣本適合于多種下游應(yīng)用，包括免疫印跡、凝膠遷移分析(EMSA)、報(bào)告基因分析以及酶活性分析
    • 可擴(kuò)展—兩種規(guī)格試劑盒，滿足從細(xì)胞和組織中抽提樣本的應(yīng)用需求
    • 方便—操作簡(jiǎn)單，無(wú)需超速梯度離心

    圖1.獲取的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)組分幾乎無(wú)交叉污染。采用NE-PER細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)抽提試劑與其他品牌的細(xì)胞核抽提試劑盒提取 HeLa 細(xì)胞。使用常用的核蛋白、胞質(zhì)蛋白和膜蛋白標(biāo)志物的抗體，采用NE-PER 試劑盒所得的細(xì)胞核組分幾乎無(wú)胞質(zhì)或膜蛋白污染。

                  
    圖2. 抽提各種組織中蛋白的Western Blot結(jié)果。使用NE-PER核蛋白和胞漿蛋白抽提試劑，從不同組織中富集和分離核蛋白和胞漿蛋白，并分別進(jìn)行Western Blot檢測(cè)。

    分離胞核和制備核蛋白抽提物的方法很多，但大多數(shù)制備核蛋白抽提物的制備方法都很耗時(shí)，并需要機(jī)械勻漿、凍融循環(huán)、反復(fù)離心或透析，而這些都可能影響核蛋白的完整性。NE-PER 核蛋白-胞漿蛋白抽提試劑盒使用了基于試劑的分離方案，能夠分步裂解細(xì)胞并從胞漿中分離出完整的細(xì)胞核，然后再?gòu)幕蚪M DNA 與 mRNA 中抽提核蛋白。這一溫和的過(guò)程可在兩小時(shí)之內(nèi)完成，且使用培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)僅需標(biāo)準(zhǔn)的桌臺(tái)式離心機(jī)即可。此外，用戶還可以從細(xì)胞培養(yǎng)物或組織樣本中分離得到具有活性的核蛋白與胞漿蛋白。

    本試劑盒能夠從兩百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中提出 200 至 500µg 胞漿蛋白和 100 至 200µg 的核蛋白（濃度為 1mg/mL）。一般情況下，胞漿蛋白與核蛋白之間的交叉污染在 10% 左右。本方法分離得到的主要是細(xì)胞核中的可溶蛋白，而非與染色質(zhì)結(jié)合的蛋白或核膜整聯(lián)蛋白。可通過(guò)調(diào)整核抽提試劑（NER）的體積來(lái)改變胞核抽提物的蛋白濃度，而不會(huì)對(duì)抽提效率造成顯著影響。從細(xì)胞中專一地抽提核蛋白是許多基因調(diào)控研究的關(guān)鍵，然而現(xiàn)有的許多分離細(xì)胞核、制備核蛋白抽提物的方法都十分耗時(shí)，且需要進(jìn)行機(jī)械勻漿、凍融循環(huán)、重復(fù)離心或透析等操作，對(duì)許多脆弱的核蛋白的完整性造成影響。NE-PER 試劑盒能夠克服這些問(wèn)題，通過(guò) EMSA 及其他分析技術(shù)為用戶提供高質(zhì)量的濃縮核蛋白抽提物。

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