NobleRyder RP9983 通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV，不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

產(chǎn)品貨號：RP9983

產(chǎn)品名稱：通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV，不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

英文名稱：Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)

產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T

通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒M-MLV不含Taq酶 核酸檢測

產(chǎn)品簡介：

儲存條件：Store at -20℃，1 year.

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder RP9983 通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV，不含Taq酶)產(chǎn)品簡介：

本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。它采用M-MLV進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，能夠獲得較長的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物用于后續(xù)的PCR擴(kuò)增和分子克隆實驗。

本試劑盒中配置的酶為進(jìn)口的酶。RT酶采用進(jìn)口的M-MLV，所以cDNA更長，基因的信息保留得更完整！反轉(zhuǎn)錄過程中特異的RNase抑制劑可有效降低由于外源RNase污染而導(dǎo)致實驗失敗的風(fēng)險。本試劑盒使用方便、快捷，可廣泛用于cDNA克隆及目的基因檢測等分子生物學(xué)實驗。

注意事項：

1、 用于cDNA合成反應(yīng)的相關(guān)試劑和耗材盡可能用DEPC進(jìn)行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，首先用經(jīng)過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進(jìn)行過濾除菌處理。

2、 試劑盒的各組分應(yīng)在-20℃保存，避免反復(fù)凍融，有效期12個月。

3、 RNA樣品要避免反復(fù)多次凍融，應(yīng)使RNA在冰浴中處于融化狀態(tài)。

操作步驟（僅供參考）：

一、反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)

關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄引物的選擇 :

（1）如果模板為真核生物來源，建議用 Oligo(dT)16 ， Oligo(dT)16可以與真核生物 mRNA 的 3’Poly A 尾配對，可獲得高產(chǎn)量的全長 cDNA。（2）模板為原核生物 RNA 的反轉(zhuǎn)錄請選用 Random引物或者基因特異性引物。Random 引物適用于mRNA、tRNA和rRNA等所有RNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，對物種沒有限制，病毒、細(xì)菌、植物、動物等都可使用。

1、在冰浴的無RNase的離心管中加入如下反應(yīng)成分：

1-5μg 總 RNA或50-500ng mRNA

2μLOligo(dT)16或 2μLRandom 或 2 pmole 基因特異性引物

補(bǔ)RNase-free ddH2O 至 14.5μL

2、70℃保溫5min后迅速在冰上冷卻2min，簡短離心收集反應(yīng)液后加入以下各組分：

4μL5×M-MLVBuffer

1μLdNTPs

0.5μL RNasin

1μLM-MLV

3、42℃溫浴60min，如果是用Random 引物，請先將離心管置25℃溫浴10min，再42℃溫浴60min。

4、95℃加熱5min終止反應(yīng)，置冰上進(jìn)行后續(xù)實驗或-20℃保存。

5、若用于后續(xù)PCR擴(kuò)增,用RNase-freeddH2O將反應(yīng)體系稀釋到50μL，取2-5μL作為PCR反應(yīng)模板。

注意事項：

1、用于cDNA合成反應(yīng)的相關(guān)試劑和耗材盡可能用DEPC進(jìn)行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，首先用經(jīng)過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進(jìn)行過濾除菌處理。

2、試劑盒的各組分應(yīng)在-20℃保存，避免反復(fù)凍融，有效期12個月。

3、RNA樣品要避免反復(fù)多次凍融，應(yīng)使RNA在冰浴中處于融化狀態(tài)。

通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒M-MLV不含Taq酶 核酸檢測

產(chǎn)品訂購信息：

RP9983  通用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(M-MLV，不含Taq酶) Universal RT-PCR Kit(M-MLV, free Taq polymerase)  50T/100T