NobleRyder C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào)：C9228

產(chǎn)品名稱：OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品規(guī)格：10*100ul

OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態(tài)細(xì)胞載體

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：-70℃

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞

是采用大腸桿菌OmniMAX2-T1菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19 質(zhì)粒檢測(cè)，轉(zhuǎn)化效率可達(dá)108cfu/µg。

基因型:

F′{proAB+lacIqlacZΔM15Tn10(TetR)Δ(ccdAB)}mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80(lacZ)ΔM15Δ(lacZYA-ar gF)U169endA1recA1supE44thi-1gyrA96relA1tonApanD

抗生素耐藥性：細(xì)胞具有四huan素抗性。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 消除了mcrA，mrr，mcrBC和hsdRMS限制系統(tǒng)，高效克隆甲基化DNA，可用于文庫(kù)構(gòu)建；

2. 具有T1、T5噬菌體抗性，保護(hù)樣品免受噬菌體的污染；優(yōu)化的基因型，避免DNA重排；

3. 可用于藍(lán)、白斑篩選；

4. 制備單鏈DNA。

操作方法：（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）

1. 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。

2. 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30分鐘。

3. 將離心管置于42℃水浴中放置60秒鐘，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2分鐘，該過程不要搖動(dòng)離心管。

4. 向每個(gè)離心管中加入500μL無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃150rpm，搖床振蕩培養(yǎng)60分鐘，目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。

5. 無菌條件下，取適量菌液加到含相應(yīng)抗生素的LB固體培養(yǎng)基平板上，用無菌的細(xì)菌涂布器或玻璃珠將細(xì)胞均勻涂開。等平板中的液體wan全吸收后，倒置平板，37℃培養(yǎng) 12-16 小時(shí)。

6. 保留剩余的菌液于4℃冰箱中，視平板上菌落生長(zhǎng)情況決定去留。

注意事項(xiàng)：

1．感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-70℃，不可反復(fù)凍融，否則其轉(zhuǎn)化效率將會(huì)降低。

2．實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，防止其它DNA或雜菌的污染，避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。

3．轉(zhuǎn)化時(shí)，轉(zhuǎn)化效率與外源DNA的濃度在一定范圍內(nèi)成正比，但當(dāng)加入的外源DNA量過多或體積過大反而會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化時(shí)DNA體積要小于感受態(tài)細(xì)胞體積的十分之一。

4．轉(zhuǎn)化率的計(jì)算：轉(zhuǎn)化率＝產(chǎn)生菌落的總數(shù)/鋪板DNA總量。

5．為防止轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)不成功，可以保留部分連接產(chǎn)物，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到最di。

OmniMAX2-T1Phage Resistant感受態(tài)細(xì)胞載體 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

C9228 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受態(tài)細(xì)胞  10*100ul