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北京諾博萊德科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第1年

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當(dāng)前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>PCR相關(guān)>> 715172× KOD PCR Master Mix(含染料)

2× KOD PCR Master Mix(含染料)

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)71517

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2025-04-23 09:40:08瀏覽次數(shù):71次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x 1ml/100x 1ml
貨號(hào) 71517 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 用于基因克隆、表達(dá)及突變分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
Taq DNAPolymerase的2倍,達(dá)到100-138bp/秒,可以在短時(shí)間內(nèi)獲得高產(chǎn)量的擴(kuò)增產(chǎn)物,特別適合于高保真地?cái)U(kuò)增6kb以內(nèi)的PCR 產(chǎn)物,擴(kuò)增所得的DNA為平末端,可用于基因克隆、表達(dá)及突變分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
KOD擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為平末端(Blunt),可直接用于Blunt載體克隆(Cat#V116、V117)
2× KOD PCR Master Mix(含染料)

諾博萊德 2× KOD PCR Master Mix(含染料)


2× KOD PCR Master Mix (含染料)


目錄號(hào):71517

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品成份

71517-05

71517-0100

2× KOD PCR Master Mix

5× 1 ml

100× 1 ml

保存條件

-20℃保存,有效期 2 年。經(jīng)常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個(gè)月。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)


產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本產(chǎn)品包含KOD DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。該酶所具有的超qiang3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高,保真性是Taq DNA Polymerase的80倍,同時(shí)具有合成速度快的特點(diǎn),聚合速度約為普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNAPolymerase的2倍,達(dá)到100-138bp/秒,可以在短時(shí)間內(nèi)獲得高產(chǎn)量的擴(kuò)增產(chǎn)物,特別適合于高保真地?cái)U(kuò)增6kb以內(nèi)的PCR 產(chǎn)物,擴(kuò)增所得的DNA為平末端,可用于基因克隆、表達(dá)及突變分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

KOD擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為平末端(Blunt),可直接用于Blunt載體克?。–at#V116、V117)

本產(chǎn)品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳;也可經(jīng)過(guò)純化處理,以用于酶切、連接、測(cè)序等后續(xù)操作。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 高產(chǎn):產(chǎn)量是普通 Taq 酶的 2 倍!

2. 高效:延伸速度 100-138bp/sec!

3. 高成功率:對(duì)于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果!

 

 

2 × KOD PCR Master Mix 使用說(shuō)明:

一、配制 PCR 反應(yīng)體系:(于冰上配制)

Component

20 μl Reaction

50 μl Reaction

終濃度

2× KOD PCR Master Mix

10 μl

25 μl

1 ×

Forward Primer(10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer(10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Template DNA

<0.2 μg

<0.5 μg

as required

ddH2O

up to 20 μl

up to 50 μl


參考模板用量:(以 50 μl 反應(yīng)體系為例)

質(zhì)粒:0.1-10 ng;

細(xì)菌基因組:10-100 ng;

人類(lèi)基因組:50-150 ng;

cDNA:1-5 μl from RT。

注意:用 ddH2O 補(bǔ)足反應(yīng)體系(體積)至 50 μl。實(shí)際操作中,首先要計(jì)算好需要補(bǔ)加 ddH2O 的量以后,建議先加水,然后按上述順序添加其它成分,最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混勻后,離心數(shù)秒使反應(yīng)混合物沉到管底,然后將反應(yīng)管置于 PCR 儀中進(jìn)行擴(kuò)增。

二、設(shè)置 PCR 循環(huán)條件:(請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)調(diào)整)

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initialdenaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

20-30 seconds

30-35 cycles

Annealing

50-60℃

20-30 seconds

Extension

72℃

1-4kb / minute

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:一般情況下,Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果擴(kuò)增片段小于 4 kb,建議 KOD 酶的延伸速度為 1kb / 15 sec;

如果擴(kuò)增片段大于 4 kb,建議延伸速度為 1kb / 20-30 sec。

三、結(jié)果檢測(cè):反應(yīng)結(jié)束后取 5 µl 反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。


2× KOD PCR Master Mix(含染料)

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