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北京諾博萊德科技有限公司
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當前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>PCR相關(guān)>> 718142×LongHiFi PCR Master Mix(含染料)

2×LongHiFi PCR Master Mix(含染料)

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號71814

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地北京市

更新時間:2025-04-23 09:55:02瀏覽次數(shù):46次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5x 1ml/100x1ml
貨號 71814 應(yīng)用領(lǐng)域 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 用于酶切、連接、熒光測序等后續(xù)操作
2× LongHiFi PCR Mix為多種采用最xian進基因工程改造而來的超保真酶添加延伸因子混合而成,極大的提高了擴增長度、擴增速度、保真性和產(chǎn)量。2× LongHiFi PCR Mix是長片段、超保真、快速擴增的首xuan產(chǎn)品。
PCR產(chǎn)物為平末端,不需要加A頭,可直接用金百特TOPO- Blunt平末端系列載體克隆。
2×LongHiFi PCR Master Mix(含染料)


諾博萊德 2×LongHiFi PCR Master Mix(含染料)


2× LongHiFi PCR Master Mix (含染料)

 

目錄號:71814

產(chǎn)品內(nèi)容

產(chǎn)品成份

71814-05

71814-0100

2× LongHiFi PCR Master Mix

5× 1 ml

100× 1 ml

保存條件

-20℃保存,有效期 2 年。

經(jīng)常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個月。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準


產(chǎn)品簡介

2× LongHiFi PCR Mix為多種采用最xian進基因工程改造而來的超保真酶添加延伸因子混合而成,極大的提高了擴增長度、擴增速度、保真性和產(chǎn)量。2× LongHiFi PCR Mix是長片段、超保真、快速擴增的首xuan產(chǎn)品。

PCR產(chǎn)物為平末端,不需要加A頭,可直接用平末端系列載體(Cat#V116、V117)克隆。

本產(chǎn)品包含LongHiFi DNA Polymerase、dNTPs和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,濃度為2×。使用時,只需加入模板、引物,并補足水至Mix終濃度為1×即可。

本制品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經(jīng)過純化處理,以用于酶切、連接、熒光測序等后續(xù)操作。

產(chǎn)品特點

1. 高產(chǎn):一般 PCR 產(chǎn)物量比傳統(tǒng)產(chǎn)量高 50%-100%!

2. 高效:延伸速度可以達到 3-4kb/min,是 pfu 的 6-8 倍!

3. 高成功率:對于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果!

4. 超高保真:保真度是 taq 的 81 倍以上。

5. 擴增長度長:以復(fù)雜基因組 DNA 為模板擴增可達 10kb,以簡單基因組、質(zhì)粒和噬菌體 DNA 為模板擴增可達 15kb。

2 × LongHiFi PCR Master Mix 使用說明:

一、配制 PCR 反應(yīng)體系:(于冰上配制)

Component

20 μl Reaction

50 μl Reaction

終濃度

2× LongHiFi PCR Mix

10 μl

25 μl

1 ×

Forward Primer (10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer (10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Template DNA

as required

as required


ddH2O

up to 20 μl

up to 50 μl


參考模板用量:(以 50 μl 反應(yīng)體系為例)

質(zhì)粒:0.1-10 ng;

細菌基因組:10-100 ng;

人類基因組:50-150 ng;

cDNA:1-5 μl from RT。

注意:實際操作中,首先要計算好需要補加 ddH2O 的量以后,建議先加水,然后按上述順序添加其它成分,最后加 LongHiFi PCR Mix,瞬離,上機。

二、設(shè)置 PCR 循環(huán)條件:(請根據(jù)實際情況適當調(diào)整)

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initial denaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

10 seconds

30-35 cycles

Annealing

50-60℃

10-15 seconds

Extension

72℃

15-20 seconds /kb

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:一般情況下,Annealing Temperature = Tm - 5°C

1. 質(zhì)粒和簡單基因組等簡單模板,可以采用 10-15 sec/kb;復(fù)雜模板 ( 如人類基因組 DNA ),可以采用 20-25 sec/kb。

2. 對于高 GC 含量的模板,預(yù)變性和變性溫度可以提高到 98℃。

3. 如果電泳發(fā)現(xiàn)主帶上下拖尾模糊現(xiàn)象,或者泳道出現(xiàn)從上樣孔拖下來的涂抹帶現(xiàn)象,一般提示延伸時間過長,梯度縮短延伸時間(建議 10-15sec/kb 為梯度減少延伸時間)直到獲得滿意結(jié)果。

三、結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取 5 µl 反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。


2×LongHiFi PCR Master Mix(含染料)

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