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CC96111Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
參考價: | 面議 |
- CC96111 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):33更新時間:2025-04-23 12:51:38
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96111 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CC96111
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
Rosetta(DE3) pLacI 菌株具有氯霉素抗性,補充大腸桿菌缺乏的 6 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA,
CUA, CCC, GGA)對應的 tRNA,提高外源基因(特別是真核基因)在原核系統(tǒng)中的表達水平。該
菌株的染色體上整合了 λ 噬菌體 DE3 區(qū)(DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶),可同時表達 T7
RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,因此可用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達。
此外,該菌株攜帶了氯霉素抗性質(zhì)粒 pLacIRARE,能夠額外表達 lac 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白,可以抑制目的
基因的本底表達水平。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,Rosetta(DE3) pLacI感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 107
cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta(DE3) pLacI
感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLacIRARE (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存,請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pLacIRARE 質(zhì)粒外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。
Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
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