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EC96310Ar 1193感受態(tài)(電轉(zhuǎn))
參考價: | 面議 |
- EC96310 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):57更新時間:2025-04-24 10:21:56
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×50ul/100×50ul |
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貨號 | EC96310 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:EC96310
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×50ul/100×50ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
Ar 1193感受態(tài)(電轉(zhuǎn))
產(chǎn)品簡介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(Agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,它能夠
感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個別裸子植物。Ar.1193 發(fā)根農(nóng)桿菌含有 pRi1193 農(nóng)
桿堿型 Ri 質(zhì)粒,特別適合豆科,茄科植物毛狀根的誘導(dǎo),同時具有羧芐青霉素,鏈霉素,利福平
抗性。本公司生產(chǎn)的 Ar.1193 電轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng) pCAMBIA2301 質(zhì)粒(卡那 霉
素抗性)檢測,轉(zhuǎn)化效率>105cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Ar. 1193
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×50 μL
100 ×50 μL
定制
基因型:Agrobacterium rhizogenes (CarbR , StrR , RifR ) pRi1193 (agropine type)
存儲條件
-80 ℃保存; 請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除農(nóng)桿堿型 Ri 質(zhì)粒 pRi1193 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)化效率≥105 cfu/μg DNA
使用方法
1. 將新的 2 mm 電擊杯插入冰中預(yù)冷;或者將儲存于 75%乙醇中的 2 mm 電擊杯和杯蓋取出,在超凈工
作臺中將其倒置于干凈的吸水紙上,使乙醇充分揮發(fā),然后插入冰中預(yù)冷;
2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中待其融化,加入 0.01-1μg 質(zhì)粒 DNA(體積不大于 5μl),用
200μl 槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速轉(zhuǎn)移到預(yù)冷的電擊杯中,蓋上杯蓋;
3. 開啟電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù)(2500 V ,200 Ω,25μF),將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中,電擊完成后快速插
入冰中,加入 900μl 無抗生素的 YEB 并將感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)移到無菌空管中,28 ℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時。
(注:此電轉(zhuǎn)化參數(shù)為 Bio-rad 推薦,使用者也可使用電轉(zhuǎn)儀所推薦的 Protocol 進(jìn)行操作)
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100μl 左右上清將菌體輕輕吹勻,并涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上,倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2~3 天。
注意事項
1. 加入質(zhì)粒時體積不應(yīng)大于感受態(tài)體積的 1/10;
2. 電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞中不可混入氣泡,轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)??上鄳?yīng)減少最終用于涂板的菌量;
3. 平板上陽性克隆密度不宜過大,為了獲得大的菌落,應(yīng)減少質(zhì)粒用量或最終用于涂板的菌量;
4. Ar.1193 具有羧芐青霉素、鏈霉素、利福平抗性,不可用于具有羧芐、鏈霉素或利福平抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)
化。
Ar 1193感受態(tài)(電轉(zhuǎn))
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