液相色譜早期提出的概念，當(dāng)時鍵合相色譜柱尚未出現(xiàn)，固定相被涂覆在載體表面，極易流失，為此科學(xué)家對流動相使用給出了合理的建議：流動相極性與固定液極性應(yīng)具有較大差別，以減少固定液流失。固定相極性弱于流動相時的液相色譜法被稱為反相色譜法，固定相極性強(qiáng)于流動相時的液相色譜法被稱為正相色譜法。盡管目前鍵合相色譜柱已成為主流，但這一概念在色譜方法開發(fā)、預(yù)測出峰順序等方面具有重要意義。
賽默飛世爾科技（中國）有限公司的液相色譜 (LC) 產(chǎn)品包含了全面的 HPLC 色譜柱產(chǎn)品線，具有廣泛選擇性的現(xiàn)代化和創(chuàng)新性設(shè)計的色譜系統(tǒng)，能夠無縫連接至 Thermo Scientific LC-MS 系統(tǒng)。 Viper手?jǐn)Q接頭幾乎可實現(xiàn)零死體積，而且可在高達(dá) 1500 bar / 22,000 psi 的條件下實現(xiàn)零滲漏，同時易于連接至 LC 接頭。 賽默飛世爾科技（中國）有限公司廣泛使用的 Chromeleon色譜分析數(shù)據(jù)系統(tǒng) (CDS) 軟件為您的色譜和質(zhì)譜系統(tǒng)的運(yùn)行和數(shù)據(jù)管理提供了完整的解決方案。
在你選擇液相色譜的分析方法時，必須考慮到其它的一些因素，比如溫度。因為溫度變化1度，保留時間將變化1-3%，所以溫度控制十分重要，溫度的變化還影響色譜柱的選擇性，這會使你更積極地投入到溫度選擇中去。在分析時柱溫一般比室溫高一點(如35℃)，因為此溫易控制，而且在低壓下有利于降低溶劑的粘度，從而降低柱壓。有時你需要利用其它的一些方法 ，如在流動相中加入部分特殊的物質(zhì)，不過我建議在你實在必須時才用這種方法，記住KISS原則(Keep it simple ，stupid)，不要使你的流動相過分復(fù)雜!
液相色譜圖片
在液相色譜分析方法中zui重要的就是色譜柱的選擇，色譜分析人員面對幾百種色譜柱，你從何入手呢?我采取的方法就是訂閱 LCGC亞太版中RonMajors 的“色譜柱觀察”這一專欄，自1984(1)年以來，RonMajors在這一專欄中介紹許多新柱子、色譜柱新技術(shù)、色譜柱使用方法等方面的信息。
現(xiàn)在大部分液相色譜分析都是使用反相液相色譜柱，其中以C18 和C8柱zui為流行。然而色譜分析并不是流行歌曲，這兩種色譜柱之所以運(yùn)用廣泛是因為在大多數(shù)情況下，使用這兩種柱子都能獲得理想的分離效果。盡管一些樣品的分離并不是這兩種柱子(如表一所示)，但 C18和C8經(jīng)常是的固定相，C18和C8柱兩者之間并無明顯的差別，但在我們實驗室中以常使用的是C8柱。
液相色譜分析人員遇到的多數(shù)樣品需要利用反相色譜柱進(jìn)行分析，但一些樣品可能需要其它的分析技術(shù)才能成功地分離。除此之外，在選擇溶劑時，溶劑的極性是zui重要的依據(jù)，有時還需要采用二元或多元組合溶劑作為流動相，以靈活調(diào)節(jié)流動相的極性或增加選擇性，以改進(jìn)分離或調(diào)整出峰時間。
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