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簡(jiǎn)介：香草是僅次于藏紅花的一種非常昂貴的香料，被廣泛用于食品、飲料、化妝品、藥品及煙草行業(yè)。利用香草最多的是香草提取物，其有兩種獲取途徑，天然產(chǎn)物和人工合成。純的香草提取物一般是通過將至少13.35盎司的香草豆浸泡在無(wú)需色譜分離及樣品制備采用AxION DSA/TOF快速鑒別天然與人造香草素應(yīng) 用 文 章作者1加侖最少含有35%乙醇的水溶液溶劑中進(jìn)行提取。有兩種人工合成的香草香精，一種物質(zhì)是香蘭素，采用廉價(jià)的原料合成，如愈創(chuàng)木酚，丁子香酚，木質(zhì)素（木材中發(fā)現(xiàn)的，天然高分子等物質(zhì)合成時(shí)生成的）；或另外一種物質(zhì)：乙基香蘭素，該物質(zhì)是被人為合成的，其味道比香蘭素強(qiáng)三倍。由香草豆制備的產(chǎn)品非常昂貴，因?yàn)橐ㄙM(fèi)大量的勞動(dòng)力，且香草需要2-3年的時(shí)間種植，這使得天然的香草香精的價(jià)格比人工合成的高3-5倍?？紤]到產(chǎn)品質(zhì)量和在價(jià)格下的利益驅(qū)動(dòng)，針對(duì)天然香草素的欺詐行為不斷發(fā)生，因此區(qū)別天然和人工合成香草素就變得十分重要的。除香蘭素外，天然香草香精含有4-羥基苯j(luò)ia醛，而人工合成的沒有。該化合物可以用作一個(gè)標(biāo)識(shí)因子快速的區(qū)別天然和人工合成的香草香料。

許多分析的技術(shù)，如GC/ MS氣質(zhì)聯(lián)用儀，LC/MS液質(zhì)聯(lián)用儀，頂空G C/MS，LC/UV及穩(wěn)定同位素比例分析，可用于區(qū)別天然和人工合成的香草香料。該類測(cè)定技術(shù)要么費(fèi)用很高，要么耗時(shí)，或兩者都有，且需要大量的方法開發(fā)和樣品制備工作。本應(yīng)用文獻(xiàn)顯示AxION®直接進(jìn)樣分析系統(tǒng)（DSATM）與AxION時(shí)間飛行（TOF）質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)可用于快速區(qū)別人工合成和天然香草提取物，且無(wú)需色譜分離和樣品制備，幾秒鐘內(nèi)就能完成

實(shí)驗(yàn)從當(dāng)?shù)厥袌?chǎng)上購(gòu)買的5種天然和人工合成或者仿造的香草提取物。所有的香草提取物都使用AxION 2 DSA/TOF系統(tǒng)分析，無(wú)需樣品制備。每個(gè)樣品用滴管直接滴10uL于AxION DSA的不銹鋼樣品靶板上。DSA/TOF MS的條件：-電暈電流5uA；-DSA加熱溫度：300oC；-輔助氣（N2）壓力為80psi；-干燥氣（N2）流速3L /min及干燥氣（N2）溫度為25oC。AxION 2 TOF MS使用負(fù)離子的掃描模式，飛行電壓為5000V。分析時(shí)毛細(xì)管出口電壓設(shè)置為-120V。質(zhì)譜圖的采集質(zhì)量范圍為50-700m/z，采集速率為5spectra/s。每個(gè)樣品的分析時(shí)間總計(jì)為15s。為了獲得更高的質(zhì)量準(zhǔn)確度，以10uL/min的速率注入校準(zhǔn)溶液對(duì)AxION 2 TOF進(jìn)行校準(zhǔn)。

結(jié)果所有10種香草提取物采用AxION DSA/TOF進(jìn)行分析。圖1和2分別是一號(hào)天然和1號(hào)人工合成香草提取物樣品的質(zhì)譜圖。由譜圖可知，兩個(gè)樣品均含有香蘭素，但是4-羥基苯j(luò)ia醛僅存在于天然香草的提取物中。該數(shù)據(jù)顯示，在使用DSA/TOF區(qū)分天然和人工合成香草提取物時(shí)，4-羥基苯jia醛可作為標(biāo)識(shí)化合物。所有的質(zhì)量測(cè)定顯示具有良好的質(zhì)量準(zhǔn)確性，誤差小于5ppm。對(duì)于其它的四個(gè)天然和人工合成的香草提取物樣品獲得了類似于圖1和2的測(cè)定結(jié)果。其它兩種人工合成香草提取物的成分標(biāo)簽標(biāo)明含有用作防腐劑苯jia酸。苯j(luò)ia酸與4-羥基苯jia醛具有相同的分子式，因此在這兩種樣品的譜圖中觀測(cè)到與4-羥基苯jia醛相同的質(zhì)譜棒圖。為了鑒別在人工合成的香草提取物樣品中是苯jia酸還是4-羥基苯jia醛，在毛細(xì)管的出口處，使用碰撞誘導(dǎo)解離（CID）技術(shù)，使其產(chǎn)生碎片離子

此 條 件 下 ， 1 0 p p m 的 苯jia酸 標(biāo) 準(zhǔn) 品 會(huì) 產(chǎn) 生 m /z=77.0397Da，該離子對(duì)應(yīng)于[M-H-CO2]-離子，10ppm的4-羥基苯jia醛不會(huì)產(chǎn)生該離子。其中一個(gè)人工合成香草提取物樣品的質(zhì)譜圖見圖3所示。m/z=121.0368Da和m/z=77.0397Da離子很容易確證存在苯甲酸。再者，m/z=165.0557Da的離子表明含有乙基香蘭素，從而確證該樣品是人工合成的香草提取物。

結(jié)論該應(yīng)用文獻(xiàn)表明利用AxION DSA/TOF快速區(qū)分天然和人工合成的香草提取物可用于鑒定食品的欺騙。該方法還表明，4-羥基苯jia醛的存在或不存在可用于鑒別天然和人工合成的香草提取物。一些人工合成的提取物中存在的苯jia酸可通過監(jiān)測(cè)[M-H-CO2]-離子來(lái)使其與4-羥基苯jia醛進(jìn)行區(qū)分。一些人工合成提取物中的乙基香蘭素也可以將其于天然的提取物分別開來(lái)。通過內(nèi)標(biāo)物質(zhì)確保測(cè)定的質(zhì)量準(zhǔn)確，誤差小于5ppm。所有樣品分析無(wú)需色譜分離，無(wú)需樣品制備，在15s內(nèi)完成。與其它建立的分析技術(shù)相比，如LC/MS和GC/MS，該應(yīng)用將提高實(shí)驗(yàn)室的效率，降低成本和分析時(shí)間