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簡(jiǎn)介目前，藥物濫用篩查方法需要長(zhǎng)時(shí)間的色譜分析和樣品制備或免疫檢測(cè)技術(shù)（EMIT）與GC/MS或LC/MS/MS鑒定聯(lián)用，這些方法需要消耗很長(zhǎng)的時(shí)間和大量的勞動(dòng)力。當(dāng)前，主要用于尿液篩自動(dòng)直接樣品分析（DSA/TOF）系統(tǒng)快速篩查和確證非法街售藥物應(yīng) 用 文 章作者Kenneth OngPerkinElmer, Inc.Singapore應(yīng) 用 文 章作者Sean Daugherty, Hayley CrowePerkinElmer, Inc.Seer Green, Beaconsfield,HP9 2FX United KingdomMass Spectrometry查的方法僅能覆蓋有限的代謝產(chǎn)物，因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不理想，使其難以跟上不斷變化的吸毒場(chǎng)所。由于各種非法和易獲得的濫用藥物種類繁多，使得全譜監(jiān)測(cè)非常重要，該技術(shù)在使用時(shí)間飛行質(zhì)譜儀（TOF-MS）時(shí)很容易實(shí)現(xiàn)。因?yàn)槎景a發(fā)作者和患者篩查的樣品數(shù)量數(shù)以千計(jì)，因此需要快速的分析技術(shù)。利用AxION® 2 TOF MS與AxION直接樣品分析系統(tǒng)（DSA™）（圖1）聯(lián)用開發(fā)了快速的篩查方法，包括篩查各種級(jí)別的街售樣品，濫用的藥物，濫用人體生長(zhǎng)激素的固體樣品，以及尿液中代謝產(chǎn)物等可能的液體樣品。

該方法采用AxION DSA系統(tǒng)快速篩查和確證，且最少或者無(wú)需樣品制備。我們給出了一個(gè)現(xiàn)實(shí)生活中的例子（圖2），分析了369個(gè)不明藥物，包括繳獲的

藥丸、樣品瓶、粉末和尿液樣品。本研究顯示了該方法具有適宜性和使用的方便性，由于用戶界面簡(jiǎn)單，使實(shí)驗(yàn)室能夠建立快速的解決方案，進(jìn)行整體設(shè)計(jì)，并給出可視化的報(bào)告（圖3）。在第一天完成儀器安裝以后，即輸出了樣品分析結(jié)果。對(duì)每個(gè)非法藥物進(jìn)行篩查和確證僅需20s，且提供豐富的譜圖信息，無(wú)需傳統(tǒng)質(zhì)譜方面的培訓(xùn)。AxION Solo™軟件利用目標(biāo)化合物的精確母離子和碎片離子質(zhì)量對(duì)其進(jìn)行確證，通過(guò)設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確質(zhì)量、同位素豐度比，使用數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行反相的自動(dòng)搜索來(lái)進(jìn)行鑒定。該數(shù)據(jù)庫(kù)含有所有目標(biāo)涉及的1-5類藥物，以及其它經(jīng)常被非法、濫用和藥品使用的化合物，超過(guò)1,000種，并可在幾分鐘之內(nèi)在數(shù)據(jù)庫(kù)中添加化合物。本應(yīng)用文獻(xiàn)使用正交的確證方法對(duì)樣品進(jìn)行鑒定，以確認(rèn)該方法相對(duì)于當(dāng)前行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確性。

再者，除了先前描述的優(yōu)點(diǎn)，利用自動(dòng)樣品分析系統(tǒng)，我們現(xiàn)在可以快速篩查許多不同類型的樣品，包括固體，液體和氣體進(jìn)行快速篩查。該系統(tǒng)通過(guò)一次性的篩網(wǎng)和玻璃毛細(xì)管將樣品引入儀器。此外，該系統(tǒng)是封閉的，以降低噪聲

試驗(yàn)條件：傳統(tǒng)樣品分析采用SPE/LC/MS/MS與DSA/TOF比較傳統(tǒng)樣品分析步驟-25min:潤(rùn)濕SPE小柱—小柱活化—樣品加入小柱—樣品分散—鹽洗脫—淋洗小柱—收集淋洗液—轉(zhuǎn)移淋洗液—運(yùn)行樣品分析—結(jié)果確證DSA/TOF樣品分析—25s：點(diǎn)樣—儀器平衡—采集譜圖—確證結(jié)果樣品制備：最少的樣品處理或無(wú)需樣品制備，利用5µL液體樣品，無(wú)樣品制備（圖4a-4b）藥片和其它固體樣品粉碎，然后固體粉末直接分析或者使用MeOH溶解后分析尿液使用甲醇：水=50:50的溶液稀釋20倍后，直接滴管滴在靶板上進(jìn)行分析

LC條件：使用DSA時(shí)不需要LC泵：PerkinElmer Flexar™ FX-10 或者 15泵，當(dāng)運(yùn)行LC-TOF時(shí)連接泵系統(tǒng)，當(dāng)DSA分析時(shí)不需要質(zhì)譜條件：質(zhì)譜儀：PerkinElmer AxION 2 TOF MS離子源：AxION DSA離子化模式：正離子譜圖采集速率：5spectra/s毛細(xì)管出口電壓：100V脈沖和捕集阱模式：50-650m/z(D7:38,D8:52)檢測(cè)器電壓：5000和8000V

質(zhì)譜校準(zhǔn)：注射一個(gè)二級(jí)外標(biāo)校準(zhǔn)物質(zhì)，正離子模式進(jìn)行5點(diǎn)校準(zhǔn)。內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)使用m/z121.05087和622.02896作為鎖定質(zhì)量離子。DSA參數(shù)：DSA加熱溫度：250℃輔助氣體：80psi干燥氣體流速：3L/min干燥氣體的溫度：25℃電暈針的電壓：2200V

從而提供*的信噪比，樣品控制整體設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單，且具有專用的未知物分析軟件。該系統(tǒng)的離子源很容易進(jìn)行更換，很容易實(shí)現(xiàn)DSA/TOF與LC/TOF在幾分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)換，以提供靈活的實(shí)驗(yàn)室操作流程。對(duì)于單個(gè)樣品已知目標(biāo)物質(zhì)的分析，使用AxION Solo軟件支持的精確質(zhì)量和同位素比進(jìn)行篩選和確證；對(duì)于分析和確證未知的目標(biāo)化合物，使用AxION ECID軟件實(shí)現(xiàn)篩查和確證。精確質(zhì)量，同位素比和碰撞誘導(dǎo)解離（CID）的精確質(zhì)量碎片使得AxIONSolo軟件可以通過(guò)下述方法進(jìn)行確證：母離子的單一同位素質(zhì)量母離子的同位素比多個(gè)碎片離子的精確質(zhì)量

結(jié)果AxION DSA/TOF 及AxION Solo用于進(jìn)行369個(gè)未知樣品濫用藥物的篩查和鑒定。由于控制軟件非常簡(jiǎn)單（圖5），樣品很簡(jiǎn)單的就被分析，無(wú)需設(shè)置復(fù)雜參數(shù)，且目標(biāo)化合物能夠被自動(dòng)進(jìn)行篩查。在本研究中檢測(cè)到53種化合物（表1）。每個(gè)樣品的分析時(shí)間少于25s。運(yùn)行的總計(jì)時(shí)間是154min，接近2.5h，并給出數(shù)據(jù)的具體分析時(shí)間。許多樣品無(wú)需進(jìn)行制備，但是加上一些樣品的破碎時(shí)間，甲醇萃取/稀釋的時(shí)間，該批樣品所有的分析時(shí)間少于4h。使用AxION Solo濫用藥物數(shù)據(jù)庫(kù)及后采集處理軟件，在一個(gè)上午就完成了對(duì)所有樣品的分析、鑒定和報(bào)告（圖6）。如圖7所示，AxION Solo軟件很容易同時(shí)實(shí)現(xiàn)多個(gè)樣品的篩查，該軟件給運(yùn)行樣品中的所有物質(zhì)質(zhì)譜圖進(jìn)行了注解，包括準(zhǔn)確質(zhì)量及與理論值誤差的ppm值。利用同位素比進(jìn)一步進(jìn)行確認(rèn)，根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，給出檢測(cè)/未檢測(cè)出目標(biāo)化合物可視化的總結(jié)，并提供檢測(cè)藥物結(jié)果的快速瀏覽和確認(rèn)。利用未知的尿液樣品來(lái)測(cè)定系統(tǒng)的靈敏度，該化合物為海luo因的代謝產(chǎn)物6-MAM。6-MAM在尿液中存在不會(huì)超過(guò)24h，因此必須采集吸食了海luo因不久的尿液樣品。6-MAM的存在表示在最近一天中吸食了海luo因。在大腦中自然就存在海luo因，但是在尿液中檢測(cè)到報(bào)告濃度的該化合物是典型的近期使用了海luo因的癥狀。

結(jié)論；AxION DSA/TOF提供了一種新的篩查非法藥品的方法，與冗長(zhǎng)的樣品制備和色譜運(yùn)行20-60min比較，該方法僅需幾秒鐘。通過(guò)AxION Solo軟件根據(jù)母離子單一同位素質(zhì)量、母離子同位素比、多個(gè)碎片離子的精確質(zhì)量、碎片離子的同位素比進(jìn)行生物樣品中未知藥物和濫用藥物的篩查和確認(rèn)，幾秒鐘內(nèi)就可完成。在幾秒鐘內(nèi)，AxION EC ID軟件可對(duì)未知非法藥品的母離子及碎片離子精確質(zhì)量進(jìn)行鑒定。該類化合物可通過(guò)公共或用戶自定義的數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行篩選，且可以簡(jiǎn)單、快速的加入自建的數(shù)據(jù)庫(kù)。如果需要色譜分離，AxION DSA能夠在幾分鐘之內(nèi)轉(zhuǎn)換至LC/TOF模式，以適合您實(shí)驗(yàn)室需要的任何工作流程