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ELISA 的檢測

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標準曲線的繪制方法

 

可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標準曲線,下面以“Curve  Exert1.3”軟件為例,繪制ELISA標準曲線的方法如下;

1 啟動“Curve  Expert1.3”

2.X軸輸入標準品的OD值,Y軸輸入所對應的濃度值,如圖:

 

3.單擊[運行]  按鈕,出現(xiàn)如下對話框

4.單擊[ok]按鈕,出現(xiàn)如下兩個對話框,關閉下面一個對話框

 

5. 在對話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱,從“1”開始依次點擊曲線名稱,在右下角會出現(xiàn)相應擬合的曲線,。

 

 

 

 

6. 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度*的曲線雙擊,出現(xiàn)如下對話框:

注意:選擇系數(shù)(即“r”值)的曲線方程來進行運算。在下面的對話框

右上角有“r”值 ,當“r”值越接近1擬合度越好

 

7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現(xiàn)如下對話框:

 

8.輸入標準的OD值,單擊[Calculate]按忸,即可得到待測蛋白的實際含量。(標本稀釋了N倍,運算出的數(shù)值應在成以N)。

 

9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,可在步驟6的對話框空白處右擊,選擇”Information”

 

10. 得到如下對話框:點擊“Copy”

 

在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)

Coefficient Data:

a =   -21.531017

b =  212.05019

c =  -0.24054479

d =  0.018060778

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