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液相色譜儀的衍生化技術(shù)介紹
閱讀：3823發(fā)布時(shí)間：2017-11-17
液相色譜儀的衍生化技術(shù)衍是指將用通常檢測(cè)方法不能直接檢測(cè)或檢測(cè)靈敏度比較低的物質(zhì)與某種試劑（即衍生化試劑）反應(yīng)，使之生成易于檢測(cè)的化合物的過(guò)程。按衍生化方法可分為柱前衍生化和柱后衍生化。
一、柱前衍生化： 柱前衍生化是指將被測(cè)物轉(zhuǎn)變成可檢測(cè)的衍生物后，再通過(guò)色譜柱分離。 這種衍生化可以是在線(xiàn)衍生化，即將被測(cè)物和衍生化試劑分別通過(guò)兩個(gè)泵送到混合器里混合并使之立即反應(yīng)完成，隨之進(jìn)入色譜柱；也可以將被測(cè)物和衍生化試劑反應(yīng)，再將衍生物作為樣品進(jìn)樣；也可以在流動(dòng)相中加入衍生化試劑，進(jìn)樣后，讓被測(cè)物與流動(dòng)相直接發(fā)生衍生化反應(yīng)。
二、柱后衍生化： 柱后衍生化是指將被測(cè)物分離，再將從色譜柱流出的溶液與衍生化試劑在線(xiàn)混合，生成可檢測(cè)的衍生物，然后導(dǎo)入檢測(cè)器。按生成衍生物的類(lèi)型可分為紫外可見(jiàn)光衍生化、熒光衍生化、拉曼衍生化和電化學(xué)衍生化等。
1、紫外可光見(jiàn)衍生化： （1）紫外衍生化是指將紫外吸收弱或無(wú)紫外吸收的有機(jī)化合物與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生化試劑反應(yīng)，使之生成可以用紫外檢測(cè)的化合物。如胺類(lèi)化合物容易與鹵代烴、羰基、?；?lèi)衍生試劑反應(yīng)。 （2）可見(jiàn)光衍生化有兩個(gè)主要的應(yīng)用：一是用于過(guò)渡金屬離子的檢測(cè)，將過(guò)渡金屬離子與顯色劑反應(yīng)，生成有色的配合物、螯合物或離子締合物后用可見(jiàn)光檢測(cè)；二是用于有機(jī)離子的檢測(cè)，在流動(dòng)相中加入被測(cè)離子的反離子，使之形成有色的離子對(duì)化合物后，分離檢測(cè)。
2、熒光衍生化： 熒光衍生化是指將被測(cè)物與熒光衍生化試劑反應(yīng)后生成具有熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。 有的熒光衍生化試劑本身沒(méi)有熒光，而其衍生物卻有的熒光。 衍生化技術(shù)不僅使液相色譜儀分析體系復(fù)雜化，而且需要消耗時(shí)間，增加分析成本，有的衍生化反應(yīng)還需要控制嚴(yán)格的反應(yīng)條件。因此，只有在找不到方便而靈敏的檢測(cè)方法或?yàn)榱颂岱蛛x檢測(cè)的選擇性時(shí)，才考慮用衍生化技術(shù)。
一、柱前衍生化： 柱前衍生化是指將被測(cè)物轉(zhuǎn)變成可檢測(cè)的衍生物后，再通過(guò)色譜柱分離。 這種衍生化可以是在線(xiàn)衍生化，即將被測(cè)物和衍生化試劑分別通過(guò)兩個(gè)泵送到混合器里混合并使之立即反應(yīng)完成，隨之進(jìn)入色譜柱；也可以將被測(cè)物和衍生化試劑反應(yīng)，再將衍生物作為樣品進(jìn)樣；也可以在流動(dòng)相中加入衍生化試劑，進(jìn)樣后，讓被測(cè)物與流動(dòng)相直接發(fā)生衍生化反應(yīng)。
二、柱后衍生化： 柱后衍生化是指將被測(cè)物分離，再將從色譜柱流出的溶液與衍生化試劑在線(xiàn)混合，生成可檢測(cè)的衍生物，然后導(dǎo)入檢測(cè)器。按生成衍生物的類(lèi)型可分為紫外可見(jiàn)光衍生化、熒光衍生化、拉曼衍生化和電化學(xué)衍生化等。
1、紫外可光見(jiàn)衍生化： （1）紫外衍生化是指將紫外吸收弱或無(wú)紫外吸收的有機(jī)化合物與帶有紫外吸收基團(tuán)的衍生化試劑反應(yīng)，使之生成可以用紫外檢測(cè)的化合物。如胺類(lèi)化合物容易與鹵代烴、羰基、?；?lèi)衍生試劑反應(yīng)。 （2）可見(jiàn)光衍生化有兩個(gè)主要的應(yīng)用：一是用于過(guò)渡金屬離子的檢測(cè)，將過(guò)渡金屬離子與顯色劑反應(yīng)，生成有色的配合物、螯合物或離子締合物后用可見(jiàn)光檢測(cè)；二是用于有機(jī)離子的檢測(cè)，在流動(dòng)相中加入被測(cè)離子的反離子，使之形成有色的離子對(duì)化合物后，分離檢測(cè)。
2、熒光衍生化： 熒光衍生化是指將被測(cè)物與熒光衍生化試劑反應(yīng)后生成具有熒光的物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。 有的熒光衍生化試劑本身沒(méi)有熒光，而其衍生物卻有的熒光。 衍生化技術(shù)不僅使液相色譜儀分析體系復(fù)雜化，而且需要消耗時(shí)間，增加分析成本，有的衍生化反應(yīng)還需要控制嚴(yán)格的反應(yīng)條件。因此，只有在找不到方便而靈敏的檢測(cè)方法或?yàn)榱颂岱蛛x檢測(cè)的選擇性時(shí)，才考慮用衍生化技術(shù)。
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