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多重 PCR 擴增實驗2022/5/7

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實驗步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿足大多數(shù)需要.如果需要提高P...

免疫熒光實驗方法中需要注意的環(huán)節(jié)2022/5/7

免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴重。2、組織切片固定：切好片風(fēng)干后立即用冰...

組織切片的免疫熒光標(biāo)記實驗2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

腫瘤細胞體外傳代培養(yǎng)及保種2022/5/7

一.細胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細胞沉淀，再150...

懸浮細胞的免疫熒光標(biāo)記實驗2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

成年小鼠的灌流實驗2022/4/30

進行實驗動物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對于未經(jīng)訓(xùn)練的實驗人員，初次進行灌流可能會失敗，故建議首先用一些對照實驗動物練習(xí)，以熟悉此過程。基本方案實驗材料小...

實驗動物的取血標(biāo)準操作規(guī)程(SOP)2022/4/30

名稱：實驗動物的取血關(guān)鍵詞：動物,取血,方法目的：規(guī)范實驗動物(家兔、狗，豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容：（一）家兔1．耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夾夾緊耳根...

藥物半數(shù)致死量LD50的測定實驗2022/4/30

實驗方法原理藥物半數(shù)致死量LD50是指藥物急性毒性實驗中，當(dāng)動物死亡率為50%時的單次給藥劑量，單位通常為mg/kg。例如，當(dāng)某藥物給予400mg劑量時，可致使一半家兔（體重約為4kg）死亡，則其LD...

實驗性胃潰瘍模型的建立與防治2022/4/30

【實驗?zāi)康摹?.學(xué)習(xí)大鼠胃潰瘍(gastriculcer)模型建立的方法。2．觀察藥物對實驗性胃潰瘍的防治作用。3．了解組織切片和HE染色方法?！緦嶒炘怼肯詽?pepticulcer)是由多種...

實時熒光定量PCRrealtime PCR2022/4/30

實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒RNA提取試劑盒熒光定量PCRMixTRIZOLdNTP氯仿逆轉(zhuǎn)錄酶MMLV異丙醇Taq酶DEPC水ddH2OTEMgCl2瓊脂糖溴化乙錠MOPS甲醛乙酸鈉EDTAEB溴酚...

ELISA 實驗常見問題解析2022/4/23

ELISA實驗因靈敏度高，特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可，但對初學(xué)者而言，如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié)，可能會對最終的實驗結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響，比如實驗出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無梯度背...

吉姆薩染色實驗2022/4/23

吉姆薩染液由天青，伊紅組成。染色原理和結(jié)果與瑞特染色法基本相同。但本法對細胞核和寄生蟲著色較好，結(jié)構(gòu)顯示更清晰，而胞質(zhì)和中性顆粒則著色較差?；痉桨笇嶒灢牧显浑s交玻片試劑、試劑盒吉姆薩染色液磷酸鈉緩...

蛋白質(zhì)檢測2022/4/23

蛋白提取組織樣本總蛋白提取（小鼠肝組織）1、頸椎脫臼處死小鼠，75%乙醇擦拭皮膚，剪開腹腔，剪切肝臟組織。2、平皿中放入6ml預(yù)冷0.9%NaCL。3、稱取0.6g左右肝組織，在平皿中剪碎組織，并轉(zhuǎn)移...

細胞免疫組化2022/4/23

1.對于貼壁細胞或細胞涂片PBS洗滌一次。2.如果細胞貼得不牢，可以干燥樣品使細胞貼得更牢。3.用4%多聚甲醛固定細胞15分鐘，用PBS洗滌一次。4.將切片移入濕盒中加入新鮮配制的3%雙氧水,以去除內(nèi)...

western blot 之發(fā)光鑒定2022/4/23

一般使用辣根過氧化物酶HRP-ECL發(fā)光法或堿性磷酸酶AP-NBT/BICP顯色法。1．HRP-ECL發(fā)光法：將A、B發(fā)光液按比例稀釋混合。膜用去離子水稍加漂洗，濾紙貼角吸干，反貼法覆于A、B混合液滴...