1取材和固定

切取組織時(shí)應(yīng)使用鋒利的刀、剪，切取組織塊時(shí)，從刀的根部開(kāi)始向后拉動(dòng)切開(kāi)組織。組織塊的厚度約為0.2~0.3cm，大小為1.5cm×1.5cm x 0.3cm為宜。取好的組織塊置于10%福爾馬林中固定48小時(shí)；

2洗滌與脫水

將固定后的組織用流水沖洗，去除殘留的固定液和雜質(zhì)。不同濃度的乙醇逐級(jí)脫水，50%、70%、85%、95%直至純酒精（無(wú)水乙醇），每級(jí)2小時(shí)。脫水必須在有蓋的瓶中進(jìn)行，以防止高濃度乙醇吸收空氣中水分導(dǎo)致濃度降低而使脫水不*。需要保存的材料可脫水至70%乙醇時(shí)停留其中，如需長(zhǎng)期保存，可加入等量的甘油。

3透明

將組織塊置入純乙醇和二甲苯的等體積混合液中2小時(shí)，再進(jìn)入純二甲苯兩小時(shí)，再一次純二甲苯兩小時(shí)；材料經(jīng)過(guò)透明，會(huì)顯示出前一步脫水的效果如何，若脫水*，組織則顯現(xiàn)透明狀態(tài)，如組織中有白色云霧狀，說(shuō)明脫水不凈，須返工處理，但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明時(shí)，應(yīng)避免其揮發(fā)和吸收空氣中的水分，并保持其無(wú)水狀態(tài)。

4浸蠟

浸蠟須在恒溫箱中進(jìn)行。先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時(shí)，再先后移入2個(gè)熔化的石蠟液中浸漬各3小時(shí)左右；

5包埋

包埋是使浸透蠟的組織塊包裹在石蠟中。具體做法是；先準(zhǔn)備好紙盒，將熔蠟倒入盒內(nèi)，迅速用預(yù)溫的鑷子夾取組織塊平放在紙盒底部，切面朝下，再輕輕提起紙盒，平放在冷水中，待表面石蠟?zāi)毯罅⒓磳⒓埡邪慈胨?，使其迅速冷卻凝固，30min后取出。

6切片

切片前將蠟塊在-20度冰箱中至少放置30min，以增加硬度。將切片刀裝在刀片機(jī)的刀架上并固定緊，固定蠟塊底座或蠟塊，調(diào)整蠟塊與刀至合適位置，刀刃與蠟塊表面呈5度角。調(diào)整切片機(jī)上的切片厚度為4-7μm，然后切片。