脂肪肝模型構(gòu)建方法

脂肪肝模型在建立肝臟疾病機(jī)理研究、藥物篩選和治療效果評(píng)估中發(fā)揮著重要作用。根據(jù)最新的研究，構(gòu)建脂肪肝模型的方法主要包括化學(xué)誘導(dǎo)模型、遺傳工程模型

和營(yíng)養(yǎng)誘導(dǎo)模型等。

  1.化學(xué)誘導(dǎo)模型：使用化學(xué)物質(zhì)如四氯化碳（CCl4）來(lái)誘導(dǎo)肝損傷和脂肪沉積，模擬非酒精性脂肪肝炎（NASH）的發(fā)展。例如，大鼠可以通過(guò)高脂飲食結(jié)合周期性

給予CCl4來(lái)構(gòu)建模型。

  2.遺傳工程模型：利用基因編輯技術(shù)如CRISPR-Cas9來(lái)構(gòu)建具有特定遺傳變異的動(dòng)物模型，以研究脂肪肝的遺傳易感性。例如，通過(guò)模擬PNPLA3 I148M等基因變

異來(lái)研究它們?cè)谥靖伟l(fā)展中的作用。

  3.營(yíng)養(yǎng)誘導(dǎo)模型：通過(guò)喂食高脂飲食來(lái)誘導(dǎo)動(dòng)物模型中的脂肪肝。這種方法簡(jiǎn)便且易于控制，適用于研究肥胖和代謝綜合征相關(guān)的脂肪肝。

在構(gòu)建脂肪肝模型時(shí)，應(yīng)仔細(xì)選擇合適的動(dòng)物模型、飼料配方、誘導(dǎo)劑劑量和給藥頻率，以確保模型的可靠性和疾病特征的準(zhǔn)確再現(xiàn)。同時(shí)，模型的構(gòu)建應(yīng)遵循相關(guān)

的倫理規(guī)范和動(dòng)物福利標(biāo)準(zhǔn)。

最新的研究進(jìn)展表明，人類胎兒肝細(xì)胞類器官模型已經(jīng)成功建立，這些模型不僅能夠模擬脂肪肝的發(fā)展，還能用于藥物篩選和靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)，特別是在NAFLD早期階段。

這些類器官模型為研究脂肪肝的發(fā)病機(jī)制和新藥開發(fā)提供了強(qiáng)有力的工具。

例：非酒精性脂肪肝模型構(gòu)建

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠品系：SD、Wistar；小鼠品系：C57BL/6、BALB/C；以及其他品系；周齡：6-8周；性別不限。

造模方法：大鼠接受4周高脂飲食，于第3周開始每周2次皮下注射40%四氯化碳豆油溶液構(gòu)建非酒精性脂肪肝模型。

圖1 造模流程示意圖

模型驗(yàn)證：對(duì)照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)完整，輪廓清晰可見，肝竇正常，肝索以中央靜脈為中心呈放射狀整齊排列，肝細(xì)胞胞質(zhì)均勻，呈多邊形，無(wú)變性；模型組肝實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重，明顯可見空泡性脂肪變性，門管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，伴有纖維化。

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