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詳細(xì)介紹:
肺炎支原體模型造模方法如下:
動(dòng)物:BALB/c小鼠
造模試劑:MPFH
造模方法:麻醉后,以MPFH 100μL (含1*107CCU/mL) 緩慢滴入鼻腔使其進(jìn)入氣管支氣管,連續(xù) 3d。
BALB/C小鼠按體重隨機(jī)分 8組 ,每組 12只 ,在 0、1、2d滴鼻感染MP菌液 ,在 0、1、2、3、4、6、8、14、2 1d分批宰殺 ,并分批設(shè)立滴注培養(yǎng)基的對(duì)照組 ,每組 4只 ,以 0~ 2 6分的組織病理學(xué)評(píng)分來(lái)確定肺部的炎癥反應(yīng)程度 ,評(píng)分包括支氣管周圍浸潤(rùn)部位的百分比、支氣管周圍浸潤(rùn)的數(shù)量、支氣管管腔內(nèi)的滲出、血管周圍的浸潤(rùn)、實(shí)質(zhì)性肺炎五方面 ,所有實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的病原學(xué)診斷均做了肺勻漿MP培養(yǎng)和肺勻漿的MPPCR鑒定。結(jié)果 經(jīng)接種菌液于感染后第 1天每 1例小鼠肺部均出現(xiàn)支氣管肺炎的炎癥反應(yīng) ,組織病理學(xué)評(píng)分平均為 6 .32分 ,于第 3、4天達(dá)到最重 ,為 11.6 0和 9.5 8分 ,以后逐漸減輕 ,于第 2 1天炎癥基本消失。本實(shí)驗(yàn)組中動(dòng)物的組織病理學(xué)評(píng)分為 0~ 19分。培養(yǎng)基對(duì)照組未出現(xiàn)肺部炎癥反應(yīng)。感染后 1、2、3、4d肺組織培養(yǎng)和PCR檢測(cè)均有MP生長(zhǎng) ,檢出率為 10 0 % (12 / 12 )。在 6、8、14、2 1d分別有 2 / 12、2 / 12、0 / 12、0 / 12檢測(cè)出支原體。結(jié)論 經(jīng) 3d滴鼻感染MP菌液 ,經(jīng)組織病理學(xué)和肺組織培養(yǎng)和PCR檢測(cè)證實(shí)可使小鼠出現(xiàn)明顯的MP肺炎 ,小鼠急性MP肺炎的模型已經(jīng)建立 .
分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái):高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。
基因組學(xué)平臺(tái):可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。
蛋白組學(xué)平臺(tái):能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。
病理學(xué)平臺(tái):涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。
臨床前CRO服務(wù):主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù),包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。
項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù):助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化,解決客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專業(yè)人和融資的需求;
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