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細(xì)胞周期檢測(cè)應(yīng)用:
腫瘤細(xì)胞周期的檢測(cè)
目的基因瞬轉(zhuǎn)/穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系的細(xì)胞周期研究
小分子化合物/多肽等藥物篩選及功能安全性研究
中藥/中間體等藥物篩選及功能安全性研究
目的基因過表達(dá)的基因功能研究
目的基因RNAi干擾的基因功能研究
microRNA過表達(dá)/干擾的調(diào)控機(jī)制研究
細(xì)胞周期檢測(cè)實(shí)驗(yàn)原理
細(xì)胞周期(Cell Cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過程,細(xì)胞的遺傳物
質(zhì)復(fù)制并均等地分配給兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期:即DNA合成
前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。某些細(xì)胞在分裂結(jié)束后暫時(shí)離開細(xì)胞周
期,停止細(xì)胞分裂,執(zhí)行一定生物學(xué)功能(G0期)。
流式細(xì)胞儀PI染色法檢測(cè)細(xì)胞周期的原理:由于細(xì)胞周期各時(shí)相的DNA 含量不同,通常正常細(xì)胞的
G1/ G0 期具有二倍體細(xì)胞的DNA含量(2N) ,而 G2/ M 期具有四倍體細(xì)胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含
量介于二倍體和四倍體之間。PI可以與DNA結(jié)合,其熒光強(qiáng)度直接反映了細(xì)胞內(nèi)DNA含量。因此,通過流
式細(xì)胞儀PI染色法對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以將細(xì)胞周期各時(shí)相區(qū)分為G1/G0 期,S 期和G2/M 期,
獲得的流式直方圖對(duì)應(yīng)的各細(xì)胞周期可通過特殊軟件計(jì)算各時(shí)相的細(xì)胞百分率。
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