精品国产亚洲国产亚洲,久热中文在线观看精品视频,成人三级av黄色按摩,亚洲AV无码乱码国产麻豆

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>工作原理>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

ibidi血管生成、侵襲等實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象

來(lái)源:拓赫機(jī)電科技(上海)有限公司   2016年08月24日 17:52  

卡西波肉瘤是一種發(fā)生在包括口腔在內(nèi)的多種組織內(nèi)的,具有*的血管生成能力和侵襲能力的惡性腫瘤??ㄎ鞑ㄈ饬鯧S已經(jīng)被鑒定出多種細(xì)胞標(biāo)記物,但是其來(lái)源依然是一個(gè)迷。美國(guó)的科學(xué)家之前發(fā)現(xiàn)卡西波肉瘤相關(guān)的皰疹病毒(KSHV)能夠使大鼠的原代間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)感染,變形,并且重新編輯,使其分化為類(lèi)卡西波肉瘤細(xì)胞。在這次的實(shí)驗(yàn)中,科研人員使用KSHV感染由多種組織來(lái)源的人原代間充質(zhì)干細(xì)胞,包括骨髓(MSCbm),脂肪組織(MSCa),牙髓,牙齦組織(GMSC),和乳牙??蒲腥藛T成功的建立起來(lái)KSHV感染的MSCa,MSCbm和GMSC(LTC-KMSCs)的穩(wěn)定株。其中,這些細(xì)胞表達(dá)了混合的KS標(biāo)記物,并且顯現(xiàn)出不同的血管生成、侵襲和變形的現(xiàn)象,而LTC-KMSCs表現(xiàn)出比未感染細(xì)胞更低的增殖率。進(jìn)而研究人員發(fā)現(xiàn)KSHV介導(dǎo)的血管生成是通過(guò)KSHV介導(dǎo)的microRNA激活了AKT通路。這些研究說(shuō)明,在人體內(nèi)MSCs是KSHV的靶細(xì)胞,會(huì)建立起多種KSHV感染的模型。

 

研究人員采用各種MSCs,鋪在基質(zhì)膠上,孵育8小時(shí),對(duì)比不同細(xì)胞的分枝數(shù)和節(jié)點(diǎn)數(shù)。

 

Thyroid Transcription Factor 1 Reprograms Angiogenic Activities of Secretome

L. Wood, N. Cox, C. Phelps, S. Lai, A. Poddar, C. Talbot and D. Mu

Scientific Reports, 2016, 10.1038/srep19857

 

(一)實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法

1)細(xì)胞:  MSCs     ScienCell Research Laboratories (Carlsbad, CA) or Lifeline Cell Technology (Frederick, MD)

2)培養(yǎng)基:      MSC medium         (MSCM; ScienCell Research Laboratories)

3)基質(zhì)膠:    Matrigel Basement membrane       (BD)    10 µl per well

4)耗材:    ibidi血管生成載玻片  (ibidi, 81506)

5)其他:        細(xì)格紙                                  

 

(二)實(shí)驗(yàn)步驟

1)準(zhǔn)備基質(zhì)膠

① 將10μl的Basement membrane以5mg/ml的濃度鋪入ibidi血管生成載玻片的內(nèi)孔中,注意槍頭要垂直于內(nèi)孔的正上方加入Matrigel,防止有Matrigel流經(jīng)上孔而留下殘留膠。

② 蓋上ibidi血管生成載玻片的蓋子。

③ 準(zhǔn)備一個(gè)10cm的培養(yǎng)皿,放入浸過(guò)水的紙巾,制成一個(gè)濕盒。

④ 將ibidi血管生成載玻片放入培養(yǎng)皿中,蓋上培養(yǎng)皿蓋。

⑤ 37℃至少孵育30分鐘,使基質(zhì)膠固化。

怎么知道加了合適體積的Matrigel:

由于Matrigel流動(dòng)性不強(qiáng),并且有可能移液槍不準(zhǔn)確,有可能10μl的膠不能填滿ibidi血管生成載玻片的下孔,這樣,必然會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)的成像結(jié)果。這時(shí)用一張格子紙就能知道移液槍調(diào)整到多少能正好把下孔填滿。

 

如上圖所示,垂直透過(guò)每個(gè)孔看下面的格子紙,如果格子被縮小了,那么就說(shuō)明膠沒(méi)加滿,格子被放大了,那么膠就加多了,格子沒(méi)發(fā)生什么變形,這才是剛剛加滿下孔的狀態(tài)。

 

 

3)鋪細(xì)胞

 

① 每孔種10000個(gè)細(xì)胞即可。準(zhǔn)備密度為2*105cells/ml的細(xì)胞懸液,充分混勻。

② 將膠已經(jīng)凝固的ibidi血管生成載玻片從濕盒中取出。

③ 每孔加入50μl的細(xì)胞懸液,注意保持槍頭垂直在上孔的上方,不要接觸下孔的凝膠??梢允褂门艠?。

④ 同樣用格子紙查看是不是加了足夠量的液體,如果沒(méi)有,加入無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)基,使上孔液體正好加滿。

⑤ 蓋上蓋,靜置,一段時(shí)間后,所有細(xì)胞都會(huì)沉下去落在Matrigel的表面。

 

4)采集圖像并統(tǒng)計(jì)結(jié)果

37度 5% CO2孵育8小時(shí)后,使用尼康Eclipse E400熒光顯微鏡采集圖像,并其分枝數(shù)和節(jié)點(diǎn)數(shù)進(jìn)行測(cè)量和統(tǒng)計(jì)。

 

三)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

 

對(duì)比LTC-KMSCs幾種細(xì)胞的成管效果。Mock是未被病毒感染的間充質(zhì)干細(xì)胞,KSHV會(huì)增強(qiáng)血管形成效果。圖像是鋪細(xì)胞后8小時(shí)采集,100倍放大倍數(shù)。

 

  1. 為了研究KSHV相關(guān)的miRNA的作用,對(duì)比了未被感染MSCs(Mock),感染的MSCs(KSHV)和用10個(gè)pre-miRNA簇缺失的突變病毒感染的MSCs(ΔmiR)和用這一突變的KSHV穩(wěn)轉(zhuǎn)的MSCs(ΔmiR Vector);以及用逆轉(zhuǎn)錄病毒重新表達(dá)這10個(gè)miRNA簇(ΔmiR Cluster)這幾組細(xì)胞的血管生成。發(fā)現(xiàn)這幾個(gè)miRNA對(duì)于細(xì)胞的血管形成有著非常重要的作用。(B) LY294002一種磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)的抑制劑,對(duì)于LTC-KMSCa血管形成有明顯的抑制作用。并且隨著LY294002濃度的上升,抑制作用會(huì)增強(qiáng)。兩組結(jié)果均是鋪細(xì)胞8小時(shí)后以100倍放大倍數(shù)采集圖像。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開(kāi)通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
久久久国产精品电影片-精品孕妇人妻一区二区三区| 人妻丝袜中文字幕在线视频-亚洲成av人片一区二区三区| 国产综合日韩激情在线-日韩精品人妻一专区二区三区| 一级小黄片在线免费看-亚洲欧美午夜情伊人888| 日韩中文字幕v亚洲中文字幕-日韩亚洲av免费在线观看| 久久精品亚洲无中文东京热-日本妹子内谢视频一区| 久久精品国产96精品-日韩人成理论午夜福利| 哦啊好大用力欧美视频-麻豆国产传媒片在线观看| 一区二区三区女同性恋-熟妇高潮一区二区高清网络视频| 中文字幕亚洲中文字幕-丰满老妇伦子交尾在线播放| 国产成人精品免费视频大全办公室-亚洲欧美日本综合在线| 中文字幕日韩精品不卡在线一区-国产tv日韩在线观看视频| 欧美伦乱淫老妇女激情吧-亚洲女邻居精品二区久久| 国产人妻人伦精品日本-国产98超碰人人做人人爱| 欧美一区二区三区调教视频-三上悠亚国产精品一区二区三区| 日韩精品人妻系列一区-亚洲女同性一区二区三区| 青木玲高清中文字幕在线看-视频在线免费观看你懂的| 午夜日韩精品在线视频-亚洲网老鸭窝男人的天堂| 国产精品中出久久久蜜臀-久久久中国精品视频久久久| 99在线观看精品视频免费-国产极品一区二区三区四区| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 欧美精品啪啪人妻一区二区-嫩草人妻舔舔羞羞一区二区三区| 亚洲国产欧美日韩不卡-熟妇激情一区二区三区| 在线观看中午中文乱码-2021国产一级在线观看| 99在线观看精品视频免费-国产极品一区二区三区四区| 国产一区二区无套内射-国内精品久久久久久久齐pp| 国产成人精品免费视频大全办公室-亚洲欧美日本综合在线| 久久高清超碰av热热久久-国产高清不卡免费视频| 欧美精品一区二区不卡-精品国产一区二区三区香蕉网址| 91麻豆免费在线视频-欧美中文天堂在线观看| 亚洲一区二区三在线观看-国产精品亚洲а∨天堂123| 亚洲av综合av一区东京热-黄页免费视频网站在线观看| 国产精品久久久精品一区-99久久免费精品国产男女性高好| 欧美日本亚一级二级三区久久精品-日韩欧美一区二区久久婷婷| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 国产精品美女在线网址-久草免费福利在线观看视频| 亚洲黄片三级三级三级-国产成人一区二区在线视频| 一级小黄片在线免费看-亚洲欧美午夜情伊人888| 久久精品国产亚洲av湖南-竹菊精品一区二区三区| 欧美日韩国产亚洲免费-肉体粗喘娇吟国产91| 久色高清精品在线国产-国产精品视频一区三区四区|