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毛細管電泳色譜儀分離分析模式詳解

來源:蘇州市萊頓科學(xué)儀器有限公司   2016年09月26日 14:37  

毛細管電泳色譜儀分離分析模式有哪些?毛細管電泳色譜儀各種分離分析模式原理是什么?下面蘇州萊頓就為大家介紹毛細管電泳色譜儀分離分析模式詳解。

毛細管電泳色譜儀(CE)是以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅(qū)動力,利用荷電粒子之間的淌度差異和分配系數(shù)差異進行分離,是分析科學(xué)繼液相色譜儀之后的又一重大進展,使分析科學(xué)從微升級進入到了納升級水平,正成為生物樣品zui重要的分離分析手段。CE分離分析模式有毛細管電色譜、毛細管區(qū)帶電泳、毛細管膠束電動色譜、毛細管凝膠電泳、毛細管等電聚焦電泳和毛細管等速電泳等。

一、毛細管電色譜:

  1、固定相:色譜固定相。

  2、原理:在毛細管中填充固定相顆粒、管壁鍵合固定相或制成連續(xù)床固定相,以電滲流或電滲流與壓力共同驅(qū)動流動相,利用樣品各組分在固定相和流動相中分配系數(shù)差異和本身淌度差異進行分離。

  3、特點:分離效率比液相色譜高,選擇性比毛細管區(qū)帶電泳高,分析速度快,分析結(jié)果重復(fù)性好。

  4、應(yīng)用:是有發(fā)展前景的分離方法,填充毛細管電色譜在蛋白質(zhì)分析中有重要潛力。

二、毛細管區(qū)帶電泳:

  1、原理:根據(jù)樣品各組分質(zhì)荷比的不同進行分離。

  2、特點:是CE中zui基本、應(yīng)用zui廣泛的一種分離模式。

  3、應(yīng)用:適用于分離蛋白質(zhì)、多肽和帶電荷的大小分子。

三、毛細管膠束電動色譜:

  1、原理:在電泳緩沖溶液中加入表面活性劑,當(dāng)溶液中表面活性劑濃度超過臨界膠束濃度時,表面活性劑分子之間的疏水基團聚集在一起形成膠束,成為分離體系的準固定相,根據(jù)樣品各組分在水相和膠束相中的分配系數(shù)差異進行分離。

  2、特點:可在分離離子型化合物的同時進行中性物質(zhì)的分離。

  3、應(yīng)用:在各個領(lǐng)域顯示出廣泛的應(yīng)用前景。

四、毛細管凝膠電泳:

  1、載體:聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠,前者應(yīng)用zui多。

  2、原理:分子篩效應(yīng)。

  3、特點:峰形尖銳,是CE中柱效zui高的一種分離模式。

  4、應(yīng)用:用于測定核酸片斷和蛋白質(zhì)相對分子量,是研究DAN排序的重要手段。

五、毛細管等電聚焦電泳:

  1、原理:利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子等電點的不同,在一個穩(wěn)定、連續(xù)、線性的pH梯度中進行分離。

  2、特點:分辨率高,區(qū)帶清晰且窄。

  3、應(yīng)用:可分離等電點差異小于 0.01pH單位的兩種蛋白質(zhì),特別適合分離相對分子量相近而等電點不同的蛋白質(zhì)組分。

六、毛細管等速電泳:

  1、原理:用淌度比樣品中任何組分的淌度都高的電解質(zhì)作為先導(dǎo)電解質(zhì),用淌度比樣品中任何組分的淌度都低的電解質(zhì)作為尾隨電解質(zhì),樣品組分夾在先導(dǎo)電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)之間,根據(jù)各自有效淌度的不同進行分離。

  2、特點:區(qū)帶界面明顯,具有富集和濃縮作用。

  3、應(yīng)用:目前應(yīng)用不多。

以上就是毛細管電泳色譜儀分離分析模式詳解。

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