ELISA試劑盒為比較3種抗牛支原體(M.bovis)血清抗體的Elisa試劑盒檢測效果,本試驗(yàn)使用3種檢測M.bovis血清抗體ELISA診斷試劑盒對38份陽性樣品(天然感染19份,人工感染18份)和37份陰性樣品進(jìn)行檢測。
ELISA試劑盒用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，與CUTOFF值比較較，然后判別標(biāo)本中牛支原體的存在與否。ELISA試劑盒此外,3種試劑盒對牛傳染性肋膜肺炎世界尺度血清(PS2)的檢測成果顯現(xiàn)HVRI試劑盒和Kit 1均為為陰性,Kit 2為陽性。因此,HVRI試劑盒與Kit 1更適于M.bovis檢測和展開流行病學(xué)查詢。用純化的牛支原體抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中支原體相結(jié)合，經(jīng)洗刷除掉未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP符號的支原體抗體結(jié)合，構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)由*洗刷后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒選用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標(biāo)本中牛支原體。一致性檢修成果顯現(xiàn):HVRI試劑盒與Kit 1的一致性較高;Kit 2與HVRI試劑盒、Kit 2與Kit 1有中度的一致性。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成*的黃色。ELISA試劑盒成果表明:本試驗(yàn)室制備的HVRI試劑盒與商品化試劑盒Kit 1的檢測成果和歸納檢測成果契合率別離到達(dá)92%和96%;而商品化試劑盒Kit 2的檢測成果與歸納檢測成果契合率僅為74.67%。