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動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法文獻(xiàn)綜述

來(lái)源:香港友誠(chéng)生物科技有限公司   2011年02月28日 11:06  

前言

 

人生活在世界中,有各種各樣的行為。這些行為構(gòu)成了我們生活的社會(huì)環(huán)境。動(dòng)物也有很多行為,繁殖行為、覓食行為、趨避行為、戰(zhàn)斗行為、利他行為等等。動(dòng)物行為學(xué)就是研究動(dòng)物行為的一門(mén)學(xué)科。通過(guò)學(xué)習(xí)前人對(duì)動(dòng)物行為學(xué)的研究得出的規(guī)律,能夠以觀察、實(shí)驗(yàn)的方式了解動(dòng)物的狀態(tài)、需求等。作為一門(mén)經(jīng)驗(yàn)性學(xué)科,實(shí)驗(yàn)方法尤為重要。本文作為0迷宮(zero maze)視頻分析系統(tǒng)的文獻(xiàn)綜述,在閱讀了12篇?jiǎng)游镄袨閷W(xué)分析論文之后選擇性提取了包括0迷宮在內(nèi)的幾種常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法,詳細(xì)做了描述。動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法文獻(xiàn)綜述

 

正文

 

動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)主要有學(xué)習(xí)記憶類、藥物成癮類、抗焦慮抑郁類、抗疲勞類、神經(jīng)精神類、痛覺(jué)測(cè)試類共六大類。其中抗焦慮抑郁類又可作為大部分動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的前置實(shí)驗(yàn),作為每一組動(dòng)物的焦慮度的一個(gè)評(píng)判。當(dāng)然洞板實(shí)驗(yàn)測(cè)得的探索性也可以作為一組動(dòng)物的生理心理指標(biāo)的。

 

2.1 學(xué)習(xí)記憶類

 

學(xué)習(xí)記憶類實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)員之間已經(jīng)建立熟識(shí)的條件,保證實(shí)驗(yàn)員與動(dòng)物的接觸不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生試驗(yàn)中的干擾因素。動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法文獻(xiàn)綜述

 

 

2.1.1 洞板實(shí)驗(yàn)

 

洞板試驗(yàn)是基于大鼠喜歡探洞的天性而設(shè)計(jì)的,它能有效反映大鼠對(duì)新環(huán)境的探索能力(Kameiet al, 2004; Calamandrei etal,1996)。實(shí)驗(yàn)箱分內(nèi)外兩層,外層為隔音用;內(nèi)層中間有一方形中空塑料柱用以限制動(dòng)物的部分活動(dòng)。內(nèi)層有22只水平方向的光電管。光電管對(duì)面設(shè)紅外線光源。一組光電管距底板40mm用來(lái)記錄活動(dòng)量、向前運(yùn)動(dòng)等。另一組光電管距底板125cm用以記錄動(dòng)物站立式的探究活動(dòng)。箱的4個(gè)角各有一個(gè)光電管,用以記錄拐角處的活動(dòng)。底板下面0.5cm處由光電管記錄大鼠的探洞次數(shù)和時(shí)間

試驗(yàn)時(shí)間30分鐘將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入洞板裝置中同時(shí)開(kāi)始測(cè)量記錄,每隔兩分鐘讀取一次探洞次數(shù)用來(lái)做探洞次數(shù)時(shí)間曲線圖。動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法文獻(xiàn)綜述

洞板實(shí)驗(yàn)實(shí)際結(jié)果中可以看出隨著時(shí)間推后,探洞頻率會(huì)降低,如果幾天重復(fù)再同一裝置中測(cè)量也能看到總探洞次數(shù)之間的顯著降低,這就表現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境已經(jīng)產(chǎn)生了學(xué)習(xí)并有一定記憶了。本實(shí)驗(yàn)測(cè)得的頻率降低程度就是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力

 

2.1.2 Morris 水迷宮

 

Morris水迷宮在20世紀(jì)80年代初就提出,至今仍然作為有效地測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的實(shí)驗(yàn)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程分為隱藏平臺(tái)獲得實(shí)驗(yàn)(hidden platform acquisition training)和空間搜索實(shí)驗(yàn)(probetrial testing)兩部分

隱藏平臺(tái)獲得實(shí)驗(yàn):用于測(cè)量動(dòng)物在水迷宮中的學(xué)習(xí)和記憶能力。實(shí)驗(yàn)時(shí)間:4天。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物自由游泳2分鐘。實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練每天進(jìn)行4次,每次60秒,隨機(jī)從東、南、西、北四個(gè)入水點(diǎn)選擇一個(gè),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物面壁放入水中,記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尋找并爬上潛伏平臺(tái)所需時(shí)間即逃避潛伏期(escape latency)。如果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在60秒內(nèi)未找到平臺(tái),由實(shí)驗(yàn)者將其引導(dǎo)至平臺(tái),逃避潛伏期記為60秒;然后使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在平臺(tái)上停留20s。每次訓(xùn)練之間和訓(xùn)練完成后,迅速將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物洗凈擦干,放在熱源附近,防止動(dòng)物體溫過(guò)低。每只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物共計(jì)訓(xùn)練16次。計(jì)算每天各組4次逃避潛伏期的平均值。

空間搜索實(shí)驗(yàn)空間搜索實(shí)驗(yàn):用于測(cè)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)平臺(tái)空間位置的記憶保持能力。第5天撤除平臺(tái),任選一個(gè)入水點(diǎn)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入水中,動(dòng)物在水中游泳60s,測(cè)量以下參數(shù):動(dòng)物在原平臺(tái)所在象限和其他各象限的游泳時(shí)間;在20%邊緣區(qū)、40%邊緣區(qū)和中心區(qū)游泳路徑的長(zhǎng)短,以分析動(dòng)物搜索策略的異同;平均游泳速度;穿越原平臺(tái)位置的次數(shù)

 

2.1.3 穿梭箱

 

此模型是由兩個(gè)外形基本相同的箱子組成,兩個(gè)箱子之間有門(mén)連通,供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)

穿梭箱可以進(jìn)行各種趨避實(shí)驗(yàn),比如足電擊,刺鼻氣味,事物香味,當(dāng)一邊設(shè)置為暗房的時(shí)候可以作為避暗實(shí)驗(yàn),從而研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力

穿梭箱模型完成的主要是兩類回避實(shí)驗(yàn)主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)和被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)

主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)動(dòng)物經(jīng)過(guò)訓(xùn)練之后記憶實(shí)驗(yàn)信號(hào)主動(dòng)采取措施逃避不利刺激,實(shí)驗(yàn)裝置為沒(méi)有明暗區(qū)別的兩的兩個(gè)箱子,實(shí)驗(yàn)分為記憶獲得和記憶保持兩個(gè)階段。在記憶獲得階段中首先把實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入其中一個(gè)箱子中,待動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境后,先給一個(gè)可以察覺(jué)的非條件刺激,比如高頻率的穩(wěn)定聲音刺激或者閃光燈強(qiáng)光刺激,間隔一段時(shí)間后(40~70秒),施加一個(gè)不利刺激,比如足底電擊,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物只有逃避到另一個(gè)箱中后方能逃避電擊,訓(xùn)練一定次數(shù),如30次。記憶獲得實(shí)驗(yàn)后的24小時(shí)和48小時(shí)進(jìn)行記憶保持實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)步驟和記憶獲得實(shí)驗(yàn)相同,記錄動(dòng)物對(duì)聲音刺激做出反應(yīng)和產(chǎn)生逃避行為的延遲時(shí)間。主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)主要反應(yīng)了動(dòng)物的非陳述記憶的能力。

被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)的思路是要讓動(dòng)物記住某一行為所帶來(lái)不良的后果,這樣動(dòng)物在下次想進(jìn)行該行為時(shí)就會(huì)十分猶豫,避暗實(shí)驗(yàn)是利用一邊為暗箱的穿梭箱來(lái)完成的被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)。在非暗箱的一邊施加照明,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入明亮的箱子中,由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物喜暗怕光的天性,動(dòng)物進(jìn)過(guò)小門(mén)進(jìn)入暗箱內(nèi),反復(fù)強(qiáng)化數(shù)次。第二天實(shí)驗(yàn)和*天相同,但實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入暗箱后,關(guān)閉兩箱之間的門(mén),并給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物持續(xù)的足底電擊數(shù)秒,把動(dòng)物取出休息一段時(shí)間后再次強(qiáng)化,數(shù)次。第三天實(shí)驗(yàn)時(shí)把動(dòng)物放在明箱內(nèi),記錄動(dòng)物從明箱進(jìn)入暗箱的延遲時(shí)間。延遲時(shí)間越長(zhǎng)表明動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力越好。

除了穿梭箱以外,跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)和爬桿實(shí)驗(yàn)也是常用的主動(dòng)回避和被動(dòng)回避的實(shí)驗(yàn)方案

 

2.2 神經(jīng)精神類

 

2.2.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)

將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放置于頂部開(kāi)口的長(zhǎng)方形實(shí)驗(yàn)盒內(nèi),盒上覆蓋玻璃。實(shí)驗(yàn)盒底部虛擬劃分為若干個(gè)大小相同的區(qū)域(以被試動(dòng)物的體型為準(zhǔn)),記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入各個(gè)區(qū)域的次數(shù),各個(gè)單位時(shí)間內(nèi)的直立次數(shù)。

根據(jù)動(dòng)物晝夜節(jié)律,進(jìn)行150分鐘的曠場(chǎng)行為實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放回飼養(yǎng)籠休息。次日相同時(shí)間(或者預(yù)實(shí)驗(yàn)測(cè)量證明的活躍程度無(wú)顯著差異的的相同時(shí)間),再次重復(fù)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是觀察研究實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)精神變化、進(jìn)入開(kāi)闊環(huán)境后的各種行為,例如動(dòng)物對(duì)新開(kāi)闊環(huán)境的恐懼而主要在周邊區(qū)域活動(dòng),在*區(qū)域活動(dòng)較少,但動(dòng)物的探究特性又促使其產(chǎn)生在*區(qū)域活動(dòng)的動(dòng)機(jī),也可觀察由此而產(chǎn)生的焦慮心理。中樞興奮藥物可以明顯增加自主的活動(dòng)而減少探究行為,一定劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動(dòng)

此外曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)還可用于學(xué)習(xí)記憶分析,通過(guò)計(jì)算直立時(shí)間曲線圖中的直立-時(shí)間曲線下的面積(area under curve,AUC),并比較實(shí)驗(yàn)AUC下降的百分比來(lái)分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力。AUC 下降幅度越大,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)于環(huán)境的記憶越深刻。

 

2.3 抗焦慮抑郁類

抗焦慮抗抑郁類藥物實(shí)驗(yàn)配合曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)以便區(qū)別中樞興奮和抗抑郁效果

 

2.3.1 強(qiáng)迫游泳

 

當(dāng)大鼠或小鼠放進(jìn)一個(gè)有限的空間使之游泳,開(kāi)始時(shí)拼命游泳力圖逃脫,很快就變成不動(dòng)狀態(tài)——僅露出鼻孔保持呼吸,四肢偶爾華東以保持身體不至于沉下去。這是動(dòng)物放棄逃脫希望的表現(xiàn),屬于行為絕望。大多數(shù)抗抑郁藥,在急性亞處理的條件下(24小時(shí)內(nèi)2~3次給藥),可以有效對(duì)抗不動(dòng)狀態(tài),使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物游動(dòng)起來(lái)

雄性大鼠,體重180-200克,實(shí)驗(yàn)前一天單籠飼養(yǎng)。將動(dòng)物分組為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)分為兩天進(jìn)行,*天單只大鼠放進(jìn)水中讓其游15分鐘,取出后在32℃溫室烤干,歸籠。給藥組可以是兩次實(shí)驗(yàn)前給,也可以只給在第二次實(shí)驗(yàn)前。經(jīng)過(guò)24小時(shí)后,再次實(shí)驗(yàn)記錄放入缸中游泳5分鐘之內(nèi)的累加不動(dòng)狀態(tài)時(shí)間,

 

2.3.2 高架0迷宮

 

高架0迷宮是一個(gè)有高架十字迷宮發(fā)展而來(lái)的既傳統(tǒng)又新穎的動(dòng)物行為學(xué)系統(tǒng)。高架0迷宮系統(tǒng)是4個(gè)相錯(cuò)的封閉開(kāi)放區(qū)間高架環(huán)形平臺(tái),封閉象限和開(kāi)放象限區(qū)別明顯,消除了十字迷宮中間的含糊區(qū)域。

首先隨機(jī)分組同一批實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,分為對(duì)照組和給藥組。實(shí)驗(yàn)前先將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物置于一敞箱中活動(dòng)5分鐘,然后開(kāi)始實(shí)驗(yàn),

對(duì)照組注入生理鹽水將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入閉臂并開(kāi)始計(jì)時(shí),測(cè)量的參數(shù)為平臺(tái)邊緣探頭次數(shù),開(kāi)臂閉臂的活動(dòng)時(shí)間、路程,進(jìn)入開(kāi)臂和閉臂的次數(shù)。給藥組注入抗焦慮或者抗抑郁藥物后測(cè)量相同參數(shù)比較得出藥物的效應(yīng)

此外高架0迷宮也可以直接作為動(dòng)物生理或者行為學(xué)的前置實(shí)驗(yàn),了解這一批動(dòng)物的焦慮狀況。

 

總結(jié)

 

"這些實(shí)驗(yàn)方法中洞板實(shí)驗(yàn)、高架0迷宮(高架十字迷宮)、曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、較常用為動(dòng)物行為學(xué)研究的前置實(shí)驗(yàn),通過(guò)這些實(shí)驗(yàn)可以很好的了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各個(gè)方面的情況。但是動(dòng)物學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)注意里要求很高較為枯燥,視頻分析系統(tǒng)正在發(fā)展,使這些枯燥的工作讓計(jì)算機(jī)自動(dòng)完成,在使動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)變得輕松的同時(shí)減少系統(tǒng)誤差。。

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