EdU系列熒光檢測(cè)產(chǎn)品

       ------點(diǎn)亮你的視野！

想做細(xì)胞增殖、細(xì)胞成像、流式分析、細(xì)胞示蹤、DNA損傷修復(fù)、病毒增殖活性檢測(cè)觀察怎么辦？ 

免疫法、染料法、同位素法……
免疫法的抗體太貴、染料法染色不清晰、同位素法太危險(xiǎn)……

小翊來(lái)幫您，全新EdU系列熒光探針，點(diǎn)亮你的視野，讓你看的更清晰！

>>>背景介紹
測(cè)定DNA合成情況是細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞毒性、DNA復(fù)制及修復(fù)、信號(hào)通路等研究方向常用方法之一，用到的檢測(cè)試劑主要是胸腺嘧啶核苷酸類似物（BrdU、EdU），兩種試劑在檢測(cè)方面有一些不同之處。BrdU免疫檢測(cè)需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，而EdU因?yàn)槠?的炔羥基團(tuán)可以與一些熒光染料發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)，無(wú)需變形，從而將細(xì)胞標(biāo)記上熒光，因此應(yīng)用更廣泛。
 
EdU 檢測(cè)增殖細(xì)胞的特點(diǎn)及原理
EdU（５‐ethynyl‐２′‐deoxyuridine，５‐乙.炔基‐２′脫氧尿嘧啶核苷）也是一種胸腺嘧啶核苷的類似物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是脫氧胸腺嘧啶環(huán)上與５位C原子相連的甲基被乙.炔基取代，在S期細(xì)胞增殖時(shí)可作為底物摻入到正在復(fù)制的DNA鏈中。
EdU在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。熒光染料可以同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)（點(diǎn)擊法），從而將增殖的細(xì)胞標(biāo)記上熒光?？捎糜诩?xì)胞成像、流式、細(xì)胞示蹤、DNA損傷修復(fù)檢測(cè)、線粒體活性檢測(cè)以及病毒增殖活性檢測(cè)等，EdU亦適用于活體注射，穩(wěn)定，對(duì)活體*。
與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)法更簡(jiǎn)單、更快速、更準(zhǔn)確，不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、器官的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。

圖1：EdU滲入DNA分子過(guò)程

>>>什么是“點(diǎn)擊法”
基于EdU的點(diǎn)擊法標(biāo)記技術(shù)是由銅催化的疊氮化物-炔烴環(huán)加成反應(yīng)（圖2），將其應(yīng)用于細(xì)胞的原位標(biāo)記需兩步過(guò)程。首先，其中一個(gè)生物反應(yīng)配體是由疊氮化物或炔烴與“構(gòu)件”（如核苷酸，核苷，氨基酸，單糖或脂肪酸）連接構(gòu)成；隨后將另一是由熒光染料、生物素或其他檢測(cè)試劑連接的互補(bǔ)炔烴或疊氮化物構(gòu)成的反應(yīng)配體在催化劑銅的存在條件下“點(diǎn)擊”到位，完成反應(yīng)
點(diǎn)擊化學(xué)與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同，EdU點(diǎn)擊檢測(cè)法不是基于抗體，無(wú)需DNA變性即可檢測(cè)摻入的核苷。EdU點(diǎn)擊檢測(cè)法可以與R-PE、GFP等熒光蛋白復(fù)用提力，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于化學(xué)方面*的小分子和低背景的標(biāo)記物以及檢測(cè)基團(tuán)之間特異性共價(jià)反應(yīng)。小分子的疊氮化物試劑可以有效地接觸DNA而無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破壞處理。進(jìn)而簡(jiǎn)化了測(cè)定流程并且獲得的結(jié)果與使用傳統(tǒng)的BrdU相似或更好

圖2：Click-iT EdU點(diǎn)擊法檢測(cè)核酸過(guò)程

>>>EdU系列產(chǎn)品特點(diǎn)
熒光染料可以在銅離子催化下同EdU發(fā)生“Click”化學(xué)反應(yīng)，將增細(xì)胞標(biāo)記上相關(guān)的熒光?？捎糜诩?xì)胞成像、流式、細(xì)胞示蹤、DNA損傷修復(fù)檢測(cè)以及病毒增殖活性檢測(cè)等，EdU亦適用于活體注射，穩(wěn)定，對(duì)活體*。

EdU檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)：

• — 僅需EdU孵育；細(xì)胞固定化；熒光檢測(cè)三步；
• — 不到3h完成檢測(cè)；
• — 標(biāo)記率高且無(wú)需變性，更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)；
• — 允許與多種抗體、熒光染料同時(shí)標(biāo)記；
• — 細(xì)胞成像、流式、細(xì)胞示蹤、DNA損傷修復(fù)檢測(cè)、病毒增殖活性檢測(cè)等。

>>>EdU系列產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果
1、Click-iT EdU熒光成像觀察（綠色、紅色、遠(yuǎn)紅色）

         

2、Click-iT EdU流式細(xì)胞儀觀察（綠色、紅色、遠(yuǎn)紅色）



>>>相關(guān)產(chǎn)品

參考資料
1. Chehrehasa F, Meedeniya AC, Dwyer P, Abrahamsen G, Mackay-Sim A. EdU, a new thymidine analogue for labelling proliferating cells in the nervous system. J. Neurosci. Methods. February 2009, 177 (1): 122–30. PMID 18996411. doi:10.1016/j.jneumeth.2008.10.006.
2.Cavanagh, Brenton; Walker, T. Norazit, A. Meedeniya, A. C. Thymidine analogues for tracking DNA synthesis.. Molecules. September 2011 15, 16 (9): 7980–93. PMID 21921870.
3.羅濤, 王彤敏, 李力燕. EdU與BrdU在檢測(cè)細(xì)胞增殖中的特點(diǎn)及應(yīng)用進(jìn)展[J]. 重慶醫(yī)學(xué), 2015(32).