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液相色譜儀是20世紀(jì)60年代末發(fā)展起來的分離分析技術(shù)，隨著不斷改進(jìn)和發(fā)展，目前已成為重要的應(yīng)用極為廣泛的化學(xué)分離分析手段。
液相色譜是目前應(yīng)用多的色譜分析方法，液相色譜系統(tǒng)由流動相儲液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對其流動相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。液相色譜的流動相通常是各種低沸點(diǎn)溶劑和水溶液。它是影響分離的一個非常重要因素。在實際工作中，流動相的選擇和優(yōu)化是確定色譜分析的主要工作。下面介紹一下液相色譜儀流動相的選擇方法。
1、由強(qiáng)到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進(jìn)行試驗，這樣可以很快地得到分離結(jié)果，然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
2、三倍規(guī)則：每減少10%的有機(jī)溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規(guī)則。這是一個聰明而又省力的辦法。調(diào)整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。
3、粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)：當(dāng)分離達(dá)到一定程度，應(yīng)將有機(jī)溶劑10%的改變量調(diào)整為5%，并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率，直至各組分的分離情況不再改變。
氣相色譜儀的流動相采用惰性氣體，對組分沒有親和力，不產(chǎn)生相互作用力，僅起運(yùn)載作用。而液相色譜儀的流動相選用不同極性的液體，選擇余地大，對組分可產(chǎn)生一定親和力，并參與固定相對組分的劇烈競爭，對分離起很大作用，為選擇分離條件提供了極大方便。
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