近年來，由深圳市耐思特科學(xué)儀器有限公司研發(fā)人員對(duì)發(fā)光細(xì)菌的研究和應(yīng)用做了大量的工作，成功研制出了水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀綜合水體毒性的測(cè)試儀器，并建立了發(fā)光細(xì)菌法生物毒性測(cè)試系統(tǒng)，為發(fā)光細(xì)菌毒性檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。

水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀檢測(cè)技術(shù)是建立在細(xì)菌發(fā)光生物傳感方法基礎(chǔ)上的毒性檢測(cè)技術(shù)，利用靈敏的光電測(cè)量系統(tǒng)測(cè)定毒物對(duì)發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度的影響，能有效地檢測(cè)突發(fā)性或破壞性的環(huán)境污染。有毒的化學(xué) 物質(zhì)、重金屬離子、抗生素、化學(xué)治療劑、農(nóng)藥等污染物質(zhì)都會(huì)影響細(xì)菌發(fā)光,所以可以用發(fā)光細(xì)菌作為敏 感的指示物，測(cè)定有毒物質(zhì)。

這類物質(zhì)抑制細(xì)菌發(fā)光的途徑有兩個(gè):一是直接抑制參與發(fā)光反應(yīng)的酶類活性；另一是抑制細(xì)胞內(nèi)與發(fā)光反應(yīng)有關(guān)的代謝過程。 因此，能夠干擾或破壞發(fā)光細(xì)菌呼吸、生長、新陳代謝等生理過程的任何有毒物質(zhì)都可以根據(jù)發(fā)光程度的根據(jù)測(cè)定結(jié)果判定毒性待測(cè)樣品急性毒性的大小，其判定標(biāo)準(zhǔn)有3個(gè):

①有毒、無毒;

②百分?jǐn)?shù)等級(jí)；

③對(duì)數(shù)等級(jí)。

國內(nèi)水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀多釆用百分?jǐn)?shù)等級(jí),百分?jǐn)?shù)等級(jí)可 根據(jù)相對(duì)發(fā)光率的大小及等當(dāng)量HgCL溶液濃度判定 待測(cè)樣品的毒性大小，也可以用EGo判定待測(cè)樣品的毒性大小，具體如表1、表2所示。

表1相對(duì)發(fā)光率毒性百分?jǐn)?shù)毒性等級(jí)變化測(cè)定。

一、基于細(xì)菌發(fā)光法的快速水質(zhì)毒性分析儀

1.水質(zhì)毒性的評(píng)定指標(biāo)

發(fā)光細(xì)菌毒性通常以相對(duì)發(fā)光率、相對(duì)抑光率、

ECjo表達(dá)，其表達(dá)公式如下:

相對(duì)發(fā)光率=

樣品光強(qiáng)度 對(duì)照光強(qiáng)度

xlOO%

相對(duì)抑光率=

對(duì)照光強(qiáng)度-樣品光強(qiáng)度

對(duì)照光強(qiáng)度

xlOO%

ECjo為相對(duì)抑光率達(dá)到50%時(shí)的樣品濃度(或稀 釋度)。

2.水質(zhì)毒性分析儀的分析方法及原理

本文以在線監(jiān)測(cè)儀為例，儀器主要有發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)裝置、光電檢測(cè)裝置、數(shù)據(jù)處理部分及數(shù)據(jù)顯示部分。分析方法是先將某種發(fā)光細(xì)菌凍干粉在配置好的營養(yǎng)液中活化，活化時(shí)間因細(xì)菌不同而不同。通常儀器有兩個(gè)檢測(cè) 通道,一路用于檢測(cè)空白對(duì)照樣品，另一路檢測(cè)被測(cè)樣 品。兩路同時(shí)與培養(yǎng)好的發(fā)光細(xì)菌混合，通過生物發(fā)光檢測(cè)裝置分別測(cè)量出發(fā)光強(qiáng)度值和7,,這樣就可 以計(jì)算樣品的相對(duì)抑光率(H)和相對(duì)發(fā)光率(£)：

H(%)=(l-#)xl00%

£(%)=-^-xl00%

A)

需要注意的是，對(duì)照樣和待測(cè)樣所加入的發(fā)光細(xì) 菌液一定要等量，測(cè)量溫度要保持一致，如果測(cè)定包 括pH值影響在內(nèi)的急性毒性，不應(yīng)調(diào)節(jié)水樣pH值。 如果要測(cè)定排除pH值影響在內(nèi)的急性毒性，需將對(duì) 照樣品pH值調(diào)節(jié)到與待測(cè)樣品一致。

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