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液相色譜常見故障的判定及解決方法

來源:廈門億辰科技有限公司   2011年07月08日 16:20  

 

液相色譜常見故障的判定及解決方法



保留時(shí)間變化
1.
柱溫變化柱恒溫,必要時(shí)需配置恒溫箱
2.
等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱
3.
緩沖液容量不夠>25mmol/L的緩沖液
4.
柱污染每天沖洗柱
5.
柱內(nèi)條件變化穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相
6.
柱快達(dá)到壽命采用保護(hù)柱

保留時(shí)間縮短
1.
流速增加檢查泵,重新設(shè)定流速
2.
樣品超載降低樣品量
3.
鍵合相流失流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向
4.
流動(dòng)相組成變化防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀
5.
溫度增加柱恒溫

保留時(shí)間延長(zhǎng)
1.
流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡
2.
硅膠柱上活性點(diǎn)變化用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
3.
鍵合相流失同前)3
4.
流動(dòng)相組成變化同前)4
5.
溫度降低同前)5

出現(xiàn)肩峰或分叉
1.
樣品體積過大用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%
2.
樣品溶劑過強(qiáng)采用較弱的樣品溶劑
3.
柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
4.
柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品
5.
進(jìn)樣器損壞更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

鬼峰
1.
進(jìn)樣閥殘余峰每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗
2.
樣品中未知物處理樣品
3.
柱未平衡重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑尤其是離子對(duì)色譜
4.
三氟乙酸(TFA)氧化肽譜每天新配,用抗氧化劑
5.
水污染反相通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量,用HPLC級(jí)的水

基線噪聲
1.
氣泡尖銳峰流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓
2.
污染隨機(jī)噪聲清洗柱,凈化樣品,HPLC級(jí)試劑
3.
檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲更換氘燈
4.
電干擾偶然噪聲采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源如水浴等
5.
檢測(cè)器中有氣泡流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓

峰拖尾
1.
柱超載降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相
2.
峰干擾清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相
3.
硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH,鈍化樣品
4.
同前)4 同前)4
5.
同前)3 同前)3
6.
死體積或柱外體積過大連接點(diǎn)降至zui低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管
7.
柱效下降用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱

峰展寬
1.
進(jìn)樣體積過大)1
2.
在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散
3.
數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)
4.
檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過大設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%
5.
流動(dòng)相粘度過高增加柱溫,采用低粘度流動(dòng)相
6.
檢測(cè)池體積過大用小體積池,卸下熱交換器
7.
保留時(shí)間過長(zhǎng)等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫
8.
柱外體積過大將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至zui小
9.
樣品過載進(jìn)小濃度小體積樣品


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