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BIA Separations 關(guān)于蛋白純化的問(wèn)題
三國(guó)時(shí)代,諸侯爭(zhēng)霸,群雄逐鹿
周瑜更是風(fēng)度翩翩、文武雙全,
全江東公瑾女孩的老公,
只可惜,到底諸葛孔明略勝*,
公瑾終飲恨江東。
pDNA的純化方案已經(jīng)日漸成熟,
常規(guī)方法亦可以滿(mǎn)足目前的需求,
奈何,偏偏又沖出一匹黑馬,
以“省時(shí)、省力、省錢(qián)”獲得業(yè)內(nèi)人士交口稱(chēng)贊
雖然常規(guī)方法還算出色,
但依然不禁讓人發(fā)出“既生瑜何生亮”之嘆。
話(huà)說(shuō)這位洋“孔明”,生于一戶(hù)洋人家族:
BIA Separations,
更有一個(gè)洋氣的名字:
BIA•整體柱•pDNA純化方案
對(duì)決:今天小編就帶大家來(lái)看一場(chǎng)高手之間的
周瑜-常規(guī)方法
VS
諸葛孔明-BIA•整體柱•pDNA純化方案
周瑜-常規(guī)方法 | 諸葛亮-BIA整體柱純化 | 整體柱純化方案的優(yōu)勢(shì) | |
純化步驟及流程對(duì)比 | |||
步驟 | 三步法 | 兩步法 | þ 步驟少 þ 裂解流程更加符合藥品的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn) þ 純化后的質(zhì)粒純度一樣 þ 減少了分子篩的需求 þ 省時(shí)、省力、省錢(qián) |
優(yōu)化的前期處理 | 必須要用中空纖維柱濃縮樣品 | 堿裂解法,CaCl2沉淀蛋白質(zhì)和RNA | |
分子篩:去除RNA,同時(shí)將緩沖液置換為疏水柱緩沖液 | |||
第二步 | 疏水柱:分離開(kāi)環(huán)DNA | DEAE離子柱:分離去除RNA,雜蛋白,內(nèi)毒素等 | |
第三步 | 離子柱:分離雜蛋白,內(nèi)毒素等 | C4柱:分離開(kāi)環(huán)DNA | |
純化成本對(duì)比 (以200mg小規(guī)模為例) | |||
所需耗材 | 10L分子篩 | 80ml套裝柱 | þ 總體成本可降低50% þ 規(guī)模越大,成本降低越多 þ GMP級(jí)別的接頭,更符合GMP標(biāo)準(zhǔn) þ 輕松放大,避免了裝填驗(yàn)證帶來(lái)的煩惱 |
100ml疏水柱 | |||
100ml離子柱 | |||
GMP接頭 | 1L以下的層析沒(méi)有GMP級(jí)別的接頭,不符合GMP的標(biāo)準(zhǔn)。 | 從8ml開(kāi)配有GMP級(jí)別的接頭 | |
純化效果 (相同的純化體積,相同的洗脫方法,相同上樣體積) | |||
DEAE離子柱純化的效果,質(zhì)粒的純度已經(jīng)達(dá)到90%以上 | 不言而喻 | ||
疏水柱 | 常規(guī)疏水柱回收率和純度不如BIA的C4整體疏水柱 | C4整體疏水柱的回收率和純度要高于常規(guī)疏水柱 |
各位做過(guò)pDNA純化的老鐵們,
說(shuō)句心底話(huà),
全面碾壓有木有?
大寫(xiě)的“省時(shí)、省力、省錢(qián)”有木有?
話(huà)不多說(shuō),繼續(xù)上圖
BIA 整體柱兩步法質(zhì)粒純化工藝流程總覽
各位做過(guò)pDNA純化的老鐵們,
圖看懂了嗎?
至于常規(guī)方法的效率,
是不是配得上
它將近二倍于BIA整體柱純化方案的價(jià)格,
我就說(shuō)兩句話(huà):
一分錢(qián)一分貨,
三分錢(qián)五分貨,
五分錢(qián)十分貨;
BIA的純化結(jié)果已經(jīng)證明了,
一張整票勝過(guò)一把零錢(qián),
一個(gè)整體柱搞定一切……
后的后,
要感謝一個(gè)人,
那位pNDA純化大神小哥哥,
無(wú)私地貢獻(xiàn)出對(duì)比數(shù)據(jù),
才有了今天精彩的*打架!
請(qǐng)收下小編的膝蓋
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