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色譜柱和柱色譜，都屬色譜技術(shù)層面，在說到色譜柱的時候，往往繞不開柱色譜，但是兩個其實有很大的區(qū)別。下面我們就來看看兩者具體的差異吧。
色譜柱概念與結(jié)構(gòu)原理
簡單的說，色譜柱是一種硬件。如果說色譜是一種分離分析手段，分離是核心，那么擔負分離作用的色譜柱就是色譜系統(tǒng)的心臟。色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。
對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹脂)、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效；對于同系物分析，只要500即可；對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要。
裝填有固定相用以分離混合組分的柱管，多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀，色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類，液相色譜通常均采用填充柱，色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相，以及色譜柱的制備和操作條件。
柱效受柱內(nèi)外因素影響，為使色譜柱達到更好的效率，除柱外死體積要小外，還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使有非常好的裝填技術(shù)，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流，流速較快，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應(yīng)。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中，柱外效應(yīng)對柱效的影響遠遠大于管壁效應(yīng)。
柱色譜概念
柱色譜則是一種技術(shù)，柱色譜法，又稱層析法，是一種以分配平衡為機理的分配方法。柱色譜是在一根玻璃管或金屬管中迸行的色譜技術(shù)，將吸附劑填充到管中而使之成為柱狀，這樣的管狀柱稱為吸附色譜柱。使用吸附色譜柱分離混合物的方法，稱為吸附柱色譜。這種方法可以用來分離大多數(shù)有機化合物，尤其適合于復(fù)雜的天然產(chǎn)物的分離。分離容量從幾毫克到百毫克級，所以，適用于分離和精制較大量的樣品。
柱色譜原理
在一定條件下，硅膠與被分離物質(zhì)之間產(chǎn)生作用，這種作用主要是物理和化學作用兩種.物理作用來自于硅膠表表面與溶質(zhì)分子之間的范德華力.化學作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質(zhì)之間的氫鍵作用。在吸附柱色譜中，吸附劑是固定相，洗脫劑是流動相，相當于薄層色譜中的展開劑。吸附劑的基本原理與吸附薄層色譜相同，也是基于各組分與吸附劑間存在的吸附強弱差異，通過使之在柱色譜上反復(fù)進行吸附、解吸、再吸附、再解吸的過程而完成的。所不同的是，在進行柱色譜的過程中，混合樣品一般是加在色譜柱的頂端，流動相從色譜柱頂端流經(jīng)色譜柱，并不斷地從柱中流出。由于混合樣中的各組分與吸附劑的吸附作用強弱不同，因此各組分隨流動相在柱中的移動速度也不同，終導(dǎo)致各組分按順序從色譜柱中流出。如果分步接收流出的洗脫液，便可達到混合物分離的目的。一般與吸附劑作用較弱的成分先流出，與吸附作用較強的成分后流出。
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