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凱氏定氮儀測(cè)定醫(yī)用膠原蛋白海綿中蛋白質(zhì)含量

來(lái)源:北京萬(wàn)斛科技有限公司   2020年07月06日 08:39  

前言

膠原蛋白海綿是以牛跟腱為原材料,通過(guò)酶解、純化制取高純Ι型膠原,再根據(jù)互貫網(wǎng)絡(luò)技術(shù)制成。 膠原分子兼有修復(fù)、止血和填充三種作用,能夠激活內(nèi)源性凝血途徑,在使用時(shí)通過(guò)壓迫創(chuàng)面激活內(nèi)源性凝血,以達(dá)到止血效果。

實(shí)驗(yàn)部分

 

1.1實(shí)驗(yàn)原理

      小麥中的有機(jī)態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下,轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾,使氨析出,用硼酸吸收后,再以鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定液進(jìn)行滴定。

1. 2 儀器與設(shè)備

K1160 全自動(dòng)凱氏定氮儀

SH 420F 石墨消解儀

 

1. 3 試劑與耗材

 

實(shí)驗(yàn)中涉及到的試劑,均為優(yōu)級(jí)純或分析純;實(shí)驗(yàn)用水為無(wú)氨蒸餾水。

1.3.1 鹽酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標(biāo)準(zhǔn)滴定液。

1. 3 . 2 硼酸溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 2% 。

1. 3. 3 氫氧化鈉溶液:質(zhì)量分?jǐn)?shù) 40% 。

1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲

酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時(shí)混合搖勻備用。

1. 3 . 5 催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片

1. 4 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1 . 4 . 1 取樣

將樣品剪碎后,稱(chēng)量0.01g 的樣品(至 0 . 1mg ),加硫酸鉀 0.3g 與硫酸銅 0 .02g ,再沿瓶壁滴加硫酸2mL 。

1 . 4 .2 消解

利用石墨消解爐進(jìn)行消解,將消化管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統(tǒng),設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表:

消化完畢后,將消化管取下冷卻。

1 . 4 . 3 上機(jī)測(cè)試

待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后,將消化管放置于定氮儀上,開(kāi)始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下:

 

式中:M-標(biāo)準(zhǔn)酸摩爾濃度(mol/L)

 W-樣品質(zhì)量(g)

 V0-樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)

 V-樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量(mL)

5.79-樣品蛋白系數(shù)

結(jié)果與討論

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