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如何通過2D細胞培養(yǎng)工作流程進行3D細胞培養(yǎng)?

來源:上海睿玥實驗器材有限公司   2020年08月06日 23:12  

細胞培養(yǎng)是藥物研發(fā)、組織工程、毒理學測試、干細胞研究以及基礎(chǔ)研究中的重要工具。在臨床前的藥物研發(fā)過程中,單層細胞培養(yǎng)仍然占主導地位。然而,2D培養(yǎng)只能在有限程度上模擬組織生理條件,而體內(nèi)細胞實際上是在三維網(wǎng)絡(luò)中相互作用 的。因此,2D培養(yǎng)產(chǎn)生的結(jié)果往往在預測臨床有效性和毒性方面作用有限,導致藥物研發(fā)過程中的高損耗率。3D細胞培養(yǎng)使細胞外基質(zhì)(ECM)組分得以表達,同時能夠形成細胞-細胞、細胞- 基質(zhì)之間的相互作用。這些特征對于復制體內(nèi)細胞的分化、增殖和體外功能是非常重要的。球狀體培養(yǎng)被認為是預測性體外篩選實驗的改進方法,其對于臨床前藥物研發(fā)具有高度生理相關(guān)性,尤其是在癌癥研究和毒理研究中。

在球狀體培養(yǎng)中,細胞在具有細胞異質(zhì)性、 營養(yǎng)和氧氣梯度的三維系統(tǒng)中生長,以更接近體內(nèi)腫瘤微環(huán)境。球體培養(yǎng)和2D單層培養(yǎng)(例如腫瘤細胞系)相比,會有顯著的功能差異,包括蛋白質(zhì)表達的改變、磷酸化模式和對抑制劑的響應。Greiner Bio-One開發(fā)了具有細胞排斥表面的CELLSTAR®細胞培養(yǎng)產(chǎn)品,用于3D培養(yǎng)。細胞排斥表面有效地防止細胞貼壁,從而可以促進三維球體的自發(fā)形成:圓底微孔板每個孔中的單個球狀體或平底板中的多個球狀體。對于高放大倍率下單個球狀體的 顯微鏡分析等應用,Greiner Bio-One還提供磁性3D細胞培養(yǎng)技術(shù),能夠滿足高通量篩選對理想光學 特性的需求。 兩種產(chǎn)品線均可以使您使用快速簡便的2D工作流程實現(xiàn)3D培養(yǎng)!

與能夠增強細胞貼壁的標準組織培養(yǎng)表面相反,細胞排斥表面能有效地防止細胞貼壁。對于半貼壁和貼壁細胞系的懸浮培養(yǎng),常規(guī)的標準疏水表面不足以勝任,而具有細胞排斥表面的CELLSTAR® 細胞培養(yǎng)容器可有效地防止細胞貼壁。自組裝的球形簇可用作3D細胞培養(yǎng)的模型,對于球狀體的形成,細胞-細胞間相互作用必須*于細胞和培養(yǎng)表面之間的相互作用。干細胞聚集體的形成也是如 此,這是多種干細胞培養(yǎng)和分化方案中的關(guān)鍵步驟。Greiner Bio-One的細胞排斥表面培養(yǎng)容器為培 養(yǎng)球狀體和干細胞聚集體提供了理想的平臺。在水凝膠中進行長期培養(yǎng)是一種常用的模擬3D環(huán)境的方法。當使用常規(guī)的組織培養(yǎng)容器進行該方法時,一些細胞傾向于從水凝膠中遷移出來,在容器表面形成2D亞群。對這種細胞群體的分析將導致數(shù)據(jù)混合有來自2D3D細胞培養(yǎng)物的信息。具有細胞排斥表面的CELLSTAR®細胞培養(yǎng)容器可用于水凝膠培養(yǎng), 因為這種表面能有效地抑制2D亞群培養(yǎng)物的形成。

同樣,在進行磁性3D細胞培養(yǎng)時,也必須避免將細胞粘附到培養(yǎng)容器的表面。Greiner Bio-OneCELLSTAR®細胞培養(yǎng)產(chǎn)品具有細胞排斥表面,可完美匹配磁性3D細胞培養(yǎng)。細胞排斥的表面特性是通過對容器表面進行創(chuàng)新的化學修飾來實現(xiàn)的。所有具有細胞排斥表面的細胞培養(yǎng)容器都通過輻射(SAL10-3)進行滅 菌,不存在可檢測的內(nèi)毒素、DNase/RNase和人源DNA,也無細胞毒性作用。細胞毒性的評估是根據(jù)EN ISO 10993-5文件用哺乳動物細胞系進行的。與所有Greiner Bio-One微孔板一樣,細胞排斥表面的微孔板的制造尺寸符合美國國家標準協(xié)會(ANSI 1-2004)的建議,以保證與所有通用型實驗室設(shè)備的兼容性??傊?,Greiner Bio-One細胞排斥表面的細胞培養(yǎng)產(chǎn)品為培養(yǎng)半貼壁和貼壁細胞系、懸浮培養(yǎng)、干細胞聚集以及球狀體的形成提供了理想的平臺。

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