分子熒光分光光度計具有性能穩(wěn)定,使用方便等特點,能夠輕松滿足對熒光樣品進(jìn)行定性、定量分析的需求。*光學(xué)設(shè)計使儀器結(jié)構(gòu)更加緊湊,從而占用更小的實驗臺面積。支持單機(jī)和聯(lián)機(jī)兩種操作模式?;贛icrosoft Windows的控制及分析軟件的簡潔易用,可輕松地進(jìn)行參數(shù)設(shè)置、數(shù)據(jù)采集和數(shù)據(jù)處理。
任何熒光物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,發(fā)射波長總是大于激發(fā)波長。熒光激發(fā)光譜是通過測定熒光體的發(fā)光通量隨波長變化而獲得的光譜,反映不同波長激發(fā)光引起熒光的相對效率。熒光發(fā)射光譜是當(dāng)熒光物質(zhì)在固定的激發(fā)光源照射后所產(chǎn)生的分子熒光,是熒光強(qiáng)度對發(fā)射波長的關(guān)系曲線,表示在所發(fā)射的熒光中各種波長相對強(qiáng)度。由于各種不同的熒光物質(zhì)有它們各自特定的熒光發(fā)射波長,可用它來鑒定熒光物質(zhì)。有些發(fā)熒光的物質(zhì)其熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比,故可用熒光分光光度法測定其含量。
分子熒光分光光度計對維生素含量的定性分析:
1.移取5ml維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻,放入石英吸收池中。在700V電壓中,在450nm—600 nm范圍內(nèi)掃描標(biāo)準(zhǔn)溶液的發(fā)射光譜,通過譜圖的分析,確定其佳熒光發(fā)射峰波長(522nm)。
2.設(shè)熒光發(fā)射峰為步驟1獲得的熒光發(fā)射峰波長,在350nm—500 nm范圍內(nèi)掃描標(biāo)準(zhǔn)溶液的激發(fā)光譜,確定其佳熒光激發(fā)峰波長(371nm)。
3.將上面獲得的激發(fā)波長為激發(fā)波長,掃描名物質(zhì)的熒光光譜,觀察所得到的光譜與上面得到光譜的異同。
分子熒光分光光度計對維生素含量的定量分析:
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:準(zhǔn)確取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液于5個25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻,在激發(fā)波長371nm,熒光波長522nm處測定熒光強(qiáng)度,以濃度對熒光強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.維生素B2含量測定:取2.0ml維生素B2待測溶液于25ml容量瓶中,用0.5mol/LHAc稀釋至刻度,搖勻;在激發(fā)波長371nm,熒光波長522nm處測定熒光強(qiáng)度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算維生素B2含量。
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