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同位素標(biāo)記13C-葡萄糖、15N-谷氨酰胺

來源:西安齊岳生物科技有限公司   2021年01月05日 18:36  

同位素標(biāo)記13C-葡萄糖、15N-谷氨酰胺

同位素示蹤標(biāo)記13C-葡萄糖、15N-谷氨酰胺

同位素示蹤(isotopic tracer technique)是利用同位素作為示蹤劑對研究對象進(jìn)行標(biāo)記的微量分析方法,即把同位素原子引入研究對象中,通過質(zhì)譜儀、核磁共振儀等分析儀器測定其反應(yīng)后的位置、數(shù)量等變化,從而了解其反應(yīng)的機(jī)制和途徑[1]。在同位素示蹤應(yīng)用的初期,放射性同位素示蹤法因其靈敏度高、檢測方便的特點(diǎn)獲得了的應(yīng)用,但由于具有放射性,使其在使用、運(yùn)輸和儲(chǔ)存方面存在不便,加之其半衰期一般較短,從而了放射性同位素的應(yīng)用。穩(wěn)定同位素通常半衰期較長,不受研究時(shí)間的,幾乎不存在性,使用也比較方便,因此,應(yīng)用穩(wěn)定同位素作為示蹤標(biāo)記物成為代謝通路及代謝機(jī)制分析研究的主要手段。

穩(wěn)定同位素示蹤(stable isotopic tracer technique)現(xiàn)已應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、工業(yè)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域,雖仍有的局限性,但在某些方面卻是其他分析手段所不能替代的[5-11]。在代謝調(diào)控研究中,采用傳統(tǒng)方法對代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析時(shí),檢測到的化合物是機(jī)體代謝的總和,無法區(qū)分來自哪條代謝通路,具體的代謝途徑只能是推測。而采用穩(wěn)定同位素示蹤可對所研究的代謝通路中的前體物質(zhì)進(jìn)行針對性的標(biāo)記(如13C-葡萄糖、15N-谷氨酰胺等),通過示蹤原子追蹤標(biāo)記化合物在機(jī)體內(nèi)的活動(dòng)規(guī)律,并依據(jù)中間代謝產(chǎn)物的同位素峰分布來判斷其代謝途徑,通過計(jì)算通量對整個(gè)代謝通路進(jìn)行分析,從而為機(jī)制的探究及科研作用機(jī)制的研究提供依據(jù)[。

近年來,隨著氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)、核磁共振法(NMR)等檢測方法的使用,穩(wěn)定同位素示蹤在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中獲得了較大的發(fā)展及應(yīng)用[16-18]。在科研代謝動(dòng)力學(xué)的研究中,使用穩(wěn)定同位素示蹤已成為臨床藥動(dòng)學(xué)研究中極-具發(fā)展前景的方法[19-20]。將標(biāo)記科研與未標(biāo)記科研同時(shí)給予人體,標(biāo)記科研可作為“生物內(nèi)標(biāo)”以由于不同時(shí)間給藥而引起的個(gè)體差異,了測試的度和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信性,進(jìn)而測試科研在某些情況下的藥動(dòng)學(xué)特征。Salabei等[21]采用穩(wěn)定同位素示蹤用4位受試者成功地探討了硝吡啶控釋制劑在胃腸道不同部位的吸收情況,該研究地運(yùn)用13C4-硝吡啶為“生物內(nèi)標(biāo)”,嚴(yán)格控制了這一除率科研可能出現(xiàn)的個(gè)體差異,同時(shí)還降低了樣本的用量,很好地解決了臨床藥動(dòng)學(xué)研究中要求有足夠大的受試樣本量的問題。

由于穩(wěn)定同位素示蹤具有的特點(diǎn),近年來,歐美一些的藥學(xué)研究者將該成功地運(yùn)藥動(dòng)學(xué)的研究中,并先后在荷蘭、英國、等地多次召開穩(wěn)定同位素研究與應(yīng)用的專題會(huì)議,以推動(dòng)該的發(fā)展。但使用該的要求條件較高,度穩(wěn)定同位素標(biāo)記科研的獲得難度大,小量合成價(jià)格昂貴,至今仍未能普及應(yīng)用。

目前商品化的穩(wěn)定同位素標(biāo)記試劑多為一些常見的小分子物質(zhì),如葡萄糖、氨基酸、脂質(zhì)等,主要針對穩(wěn)定同位素示蹤在糖、脂、氨基酸以及等內(nèi)源性物質(zhì)代謝調(diào)控中的應(yīng)用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

 

來源:齊岳生物

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