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食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸的同時(shí)分析

來源:鄭州鴻朗科技有限公司   2021年02月22日 16:24  

安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸均為食品添加劑,安賽蜜、糖精鈉為甜味劑,苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸為防腐劑。我們這次嘗試將五種食品添加劑共同分析,以提高檢測(cè)效率。

 

GB5009.28-2016條件下分析

首先,我們嘗試按照GB5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定項(xiàng)下方法,使用SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱,對(duì)安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分析。

結(jié)果如下圖所示在國標(biāo)原條件下可達(dá)到五種物質(zhì)分離度大于2.5的良好分離結(jié)果(峰上所標(biāo)數(shù)值為分離度)。

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動(dòng)相:20 mmol/L 乙酸銨:甲醇=95:5

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:各約0.1 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

 

隨后,我們嘗試使用SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色譜柱在相同條件下,對(duì)市售飲料及糕點(diǎn)實(shí)際樣品進(jìn)行分析,結(jié)果如下圖所示,飲料樣品中未檢出五種添加劑,糕點(diǎn)樣品中可檢出山梨酸、脫氫乙酸峰,整體分離結(jié)果及峰形良好。

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動(dòng)相:20 mmol/L 乙酸銨:甲醇=95:5

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:40 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

樣品:飲料樣品:以水為稀釋劑稀釋至40 mg/mL;糕點(diǎn)樣品:稱取樣品400 mg于10 mL容量瓶中,加5 mL水超聲20min,冷卻后加入400 µL 92 g/L的和400 µL 183 g/L的乙酸鋅溶液,加水定容超聲5 min,離心,過濾。

 

 

國標(biāo)原流動(dòng)相基礎(chǔ)上加甲酸進(jìn)行分析

為了進(jìn)一步改善脫氫乙酸峰形及各物質(zhì)間分離,我們嘗試在國標(biāo)流動(dòng)相基礎(chǔ)上加入2 mmol/L甲酸,同時(shí)為避免酸性物質(zhì)保留過強(qiáng),采用梯度洗脫的方式來進(jìn)行分析。結(jié)果表示,本方法可在20 min內(nèi)得到五種物質(zhì)分離度大于4.9的良好分離結(jié)果,且各峰峰形均得到明顯改善。但由于甲酸的加入導(dǎo)致出峰順序有所改變,苯甲酸、山梨酸保留有所延長(zhǎng)。

下圖分別為采用此流動(dòng)相方法分別對(duì)混合標(biāo)準(zhǔn)品和實(shí)際樣品的分析結(jié)果。

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動(dòng)相:A:20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸  B:甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:各約0.1 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

 

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm

流動(dòng)相:A:20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸  B:甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:40 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

樣品:飲料樣品:以水為稀釋劑稀釋至40 mg/mL;

糕點(diǎn)樣品:稱取樣品400 mg于10 mL容量瓶中,加5 mL水超聲20 min,冷卻后加入400 µL 92 g/L的亞鐵和400 µL 183 g/L的乙酸鋅溶液,加水定容超聲5 min,離心,過濾。

 

 

使用4.6x150 mm規(guī)格色譜柱進(jìn)行分析

為了縮短分析時(shí)間,我們也嘗試使用GB5009.28-2016方法以及上面提到的國標(biāo)原流動(dòng)相基礎(chǔ)上加甲酸的方法,使用4.6x150 mm規(guī)格的SUPERIOREX ODS色譜柱,對(duì)安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分析。如下面結(jié)果所示,使用150 mm柱長(zhǎng)的色譜柱,可以縮短分析的時(shí)間。

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流動(dòng)相:20 mmol/L 乙酸銨:甲醇=95:5

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸各約0.1mg/mL;山梨酸、脫氫乙酸各約0.067 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

 

 

 

 

HPLC Conditions :

色譜柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm

流動(dòng)相:A:20 mmol/L 乙酸銨+2 mmol/L甲酸  B:甲醇

B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)

流速:1.0 mL / min

溫度:35 °C

檢測(cè):PDA 230 nm

濃度:各約0.1 mg/mL

進(jìn)樣量:10 µL

 

 

 

總結(jié)

綜上所述,按照GB5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精鈉的測(cè)定項(xiàng)下方法,無論使用柱長(zhǎng)150 mm還是250 mm的SUPERIOREX ODS色譜柱,均可得到安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉以及脫氫乙酸五種食品添加劑混合標(biāo)準(zhǔn)品的基線分離結(jié)果。

 

流動(dòng)相中加酸的梯度條件可明顯改善色譜峰形及分離,但苯甲酸、山梨酸保留會(huì)變強(qiáng),五種物質(zhì)出峰順序較國標(biāo)原方法會(huì)有所變化。若想進(jìn)一步改善糖精鈉、苯甲酸之間的分離度,可適當(dāng)延長(zhǎng)初始有機(jī)相運(yùn)行時(shí)間。

 

本次所選的飲料樣品中不含本次檢測(cè)的五種食品添加劑;糕點(diǎn)樣品中檢出山梨酸、脫氫乙酸。使用250 mm柱長(zhǎng)的SUPERIOREX ODS色譜柱可得到兩種樣品的良好分析結(jié)果。

 

由于食品樣品多種多樣,本次只選擇兩種樣品,很難說具有廣泛代表性,客戶可根據(jù)自己的樣品情況對(duì)分析條件進(jìn)行進(jìn)一步優(yōu)化。

 

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