一、儀器簡介及使用范圍:

      生物化學(xué)需氧量BOD5是水質(zhì)評價的必測項目，是衡量有機物對水質(zhì)污染的重要質(zhì)量指標。傳統(tǒng)BOD5的測定方法采用化學(xué)稀釋法。該方法操作繁瑣，對分析人員的實驗技能要求較高，實驗數(shù)據(jù)的離散性較大，往往造成無法得出準確的實驗結(jié)果。

     CY-II型直讀式BOD5測定儀是利用空氣壓差法進行生化需氧量測定的一種新型儀器，其操作簡單，能提供與化學(xué)稀釋法可比的準確測量結(jié)果，讀數(shù)直觀，使用和維護方便。廣泛應(yīng)用于環(huán)保監(jiān)測、石油化工、醫(yī)療衛(wèi)生、教學(xué)科研等部門對水質(zhì)的監(jiān)測，是廣大分析工作者的有力工具。

二、工作原理:

     1、B0D5基本原理定義生化需氧量（BOD5）定義為水中需氧微生物消耗溶解氧的量，當(dāng)樣品放在培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)溫度為20℃養(yǎng)五天時，測定所消耗溶解氧的含量來確定水樣的BOD5值。

　　生化需氧量（英文縮寫B(tài)OD），是指在特定條件下，通過水中需氧微生物的繁殖和呼吸作用，分解水中有機物質(zhì)時所消耗或所需要溶解氧量。水中的BOD5值通常以樣品在20℃放置5天所消耗溶解氧的量（mg/L數(shù)）表示，記為“BOD5”。

    2、測定原理將預(yù)先選好量程并按量程范圍量好體積的水樣倒入培養(yǎng)瓶中，在主機攪拌器上連續(xù)攪拌。并將主機和培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度為20℃±1℃，待樣品恒溫后進行五日培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中的水樣在連續(xù)攪拌的情況下保證了足夠的溶解氧供微生物進行生化反應(yīng)。水樣中的有機物經(jīng)過生物氧化作用，轉(zhuǎn)變成氮、碳和硫的氧化物。在這一過程中，從水樣中溢出的氣體二氧化碳被氫氧化鈉（或氫氧化鉀）吸收。此時，培養(yǎng)瓶中空氣壓力減少量，相當(dāng)于微生物所消耗的溶解氧含量，即水樣BOD5值與瓶中空氣壓力減少的程度成正比，所以BOD5的值可以由空氣壓力減少值來測定，增加或減少所取樣品的量可以增加或降低壓力減少值。這樣操作者就能準確測量很寬范圍的BOD5值。培養(yǎng)瓶中空氣壓力的變化是通過壓力計中汞柱高度的變化來進行檢測的，通過簡單的計算即能讀出水樣的BOD5值。

三、主要技術(shù)指標

1、環(huán)境溫度：0℃～40℃

2、測定方法：差壓法

3、測量范圍：0mg/L～1000mg/L（BOD5值超過測量范圍時需要稀釋）

4、批處理量：每次8份水樣

5、準 確 度：符合國標“GB7488-87”標準規(guī)定（葡萄糖谷氨酸標液BOD5值在180mg/L～230mg/L范圍內(nèi)）

6、顯    示：從壓力計刻度尺上可直讀出樣品BOD5值（mg/L）

7、培養(yǎng)溫度：20℃±1℃

8、電    源：DC12V

9、主機尺寸：400mm×270mm×350mm

10、主機重量：5kg11、功    耗：儀器18W

四、儀器的組成本儀器由BOD測定裝置主機、BOD培養(yǎng)瓶、配件盒及生化培養(yǎng)箱組成。

五、安裝和使用

（一）本儀器的安裝環(huán)境條件：

1、溫度：0℃～40℃2、濕度：≤80％

（二）儀器部件說明

    1、攪拌子    2、壓力計管     3、旋鈕       4、培養(yǎng)瓶      5、水樣6、刻度尺    7、NaOH（固）   8、密封杯     9、培養(yǎng)瓶蓋    10、接頭11、連接管   12、水柱蓋      13、密封圈    14、水柱       15、水     16、汞       17、密封管主機在實驗時，主機放入培養(yǎng)箱內(nèi)，主機內(nèi)有8只磁力攪拌器，實驗過程中它帶動培養(yǎng)瓶內(nèi)的攪拌子對水樣進行攪拌，以促進培養(yǎng)瓶內(nèi)空氣中的氧氣溶解于樣品液中，保證在整個實驗過程中，水樣中的微生物有足夠的溶解氧進行生化反應(yīng)。

  2、BOD培養(yǎng)瓶樣品放人培養(yǎng)瓶中進行生化培養(yǎng)，該培養(yǎng)瓶經(jīng)過篩選處理，各臺儀器之間一般不可互換，亦不容許用其它類似的瓶代替。

（三）準備工作

      1、開箱檢查，按裝箱清單核對主機、培養(yǎng)瓶、配件盒及生化培養(yǎng)箱是否齊全。

　　2、檢查實驗用電源，應(yīng)為交流220V±22V，頻率50Hz±0.5Hz。

　　3、為確保安全和儀器工作正常，儀器應(yīng)有可靠的接地線。

（四）儀器安裝（如圖2）圖21、攪拌子    2、壓力計管     3、旋鈕       4、培養(yǎng)瓶     5、培養(yǎng)液6、刻度尺    7、NaOH（固）   8、密封杯     9、培養(yǎng)瓶蓋   10、接頭11、連接管   12、水柱蓋      13、密封圈    14、水柱      15、水16、汞       17、密封管      18、注射器灌水銀：用注射針筒將裝置中附帶的水銀分別裝到八個水銀瓶中。

步驟為：擰開水銀瓶蓋，用針筒分別小心地對八個水銀瓶灌入1.6～1.8ml水銀，再分別注入1-2ml蒸餾水以防水銀蒸發(fā)。調(diào)整水銀壓力計零點：用膠吸球（洗耳球）將壓力計的水銀柱吸到滿標尺，然后松開吸球讓其自由下降，正常時水銀柱降至一定位置時應(yīng)有回跳一兩次的現(xiàn)象，顯得較靈活，若水銀柱下降較慢且平穩(wěn)無回跳現(xiàn)象，可能水銀中有雜物或水銀中夾有氣泡，應(yīng)設(shè)法清除，對于水銀加的氣泡可用洗耳球?qū)⑺y柱壓入后反復(fù)多次吸上放下，直至將氣泡排除為止，八條水銀柱高低應(yīng)基本一致且活動靈活。

六、分析方法及分析步驟

（一）四種無機鹽的制備1、緩沖液用蒸餾水溶解下列試劑并稀釋至1升。

　?。?）21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4）。

　?。?）8.5g磷酸二氫鉀（KH2PO4）。

　?。?）33.4g磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7 H2O濕度在61.07％～80.51％穩(wěn)定）。

　?。?）1.7g氯化銨（N H4Cl）。

　　2、硫酸鎂溶液在蒸餾水中溶解22.5克硫酸鎂（MgSO 4·7H2O）并稀釋至1升。

　　3、氯化鈣溶液在蒸餾水中溶解27.5克氯化鈣（CaCl2）并稀釋至1升。

　　4、三氯化鐵溶液在蒸餾水中溶解0.25克三氯化鐵（FeCl3·6H2O）并稀釋至1升。

　　★制備無機鹽溶液所使用的蒸餾水不應(yīng)含有微生物生長抑制劑（如堿、無機酸、余氯和重金屬）。

（二）實際樣品BOD 5的測量

    1、接通培養(yǎng)箱電源，將培養(yǎng)箱上溫度設(shè)置顯示溫度為20℃，保持溫度為20℃。把主機放在培養(yǎng)箱上，將BOD主機電源線的一端插入儀器后部插座上，另一端插入培養(yǎng)箱內(nèi)對應(yīng)插座上，打開儀器電源開關(guān)，儀器前側(cè)電源指示燈亮，8只攪拌器正常攪拌。

　葡萄糖——谷氨酸標準樣品BOD5試驗方法如下：

　　1、制備稀釋水取1只2000mL燒杯，用量筒量取2000mL蒸餾水倒入燒杯中，在燒杯中加入四種無機鹽各2mL。

　　2、將制備好的稀釋水倒出約200mL用于溶解300mg葡萄糖（C6H12O6）和300mg谷氨酸（如實驗室用葡萄糖帶一個結(jié)晶水，葡萄糖稱量330mg，這種標準溶液應(yīng)在每次使用前新鮮配制），溶解后再倒入盛有稀釋水的燒杯中。在燒杯中放一攪拌子，燒杯放在培養(yǎng)箱內(nèi)主機上恒溫攪拌2～3小時。

　　3、用1000mL燒杯取新鮮的生活污水作為接種液，把燒杯放在培養(yǎng)箱內(nèi)的主機上與標準樣品同時恒溫2～3小時。

　　4、待標準樣品全部溶解后，按10％接種，用量筒倒出200mL，再用量筒取200mL生活污水倒人標準樣品中，將接種后的標準樣品仍放在培養(yǎng)箱內(nèi)攪拌器上恒溫攪拌1～2小時。

　　5、按說明書表格中0～300mg/L量程規(guī)定的取水樣量量取接種后的標準樣品，分別倒人7個培養(yǎng)瓶中，另一個培養(yǎng)瓶按0～100測量范圍取接種水進行平行測定。

　稀釋CY-II型直讀式BOD5測定儀測定范圍為0～1000mg/L。如果試驗樣品的BOD5估計值高于1000mg/L可用稀釋水稀釋樣品。所加入的稀釋水也應(yīng)保持為20℃，并曝氣使氧達到飽和，如需要若干份相同的樣品試驗時，應(yīng)稀釋足夠量的原水樣，并從稀釋樣中取出與量程對應(yīng)的體積。例如，當(dāng)試驗原水樣稀釋兩倍時，稀釋倍數(shù)為2；當(dāng)原水樣按1:10稀釋時，則應(yīng)為10，所測結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。

      接種什么是接種BOD5實驗要求水樣含有供生物氧化的有機物和適量的氧化有機物的需氧細菌，以及吞食有機物和增進需氧細菌生長的其他微生物。如果水樣中根本沒有或幾乎沒有這類微生物，就必須對水樣按一定比例加入這類微生物溶液。這個過程應(yīng)稱之為接種。

　　與生活污水不同，工業(yè)廢水可能不含有足夠量的細菌以供樣品中所含有機物*的生化分解，如果所測定的樣品為這種廢水，應(yīng)加入接種溶液。

　　接種方法制備接種溶液接種溶液用于接種的溶液為20℃放置24～36小時的未經(jīng)處理新鮮生活污水的上清液。

　　在下次實驗中，若要使用以前測定過的水樣作為接種液應(yīng)經(jīng)濾紙過濾，這種濾液在冷藏（約20℃）、避光的條件下保存，一般在一個月內(nèi)是有效的。

　　將準備測定的樣品放入培養(yǎng)瓶中，使用吸管將一定量的接種液加入到樣品中（根據(jù)樣品量）。按步驟測定BOD5，五日后獲得的讀數(shù)可以作為試驗樣品真實的BOD5值。