魚精蛋白的提取:
成熟精巢組織-均漿-硫酸酸解-NACL溶液提取-四層紗布過濾-加乙醇沉淀雜蛋白-離心-上清液-加TCA溶液沉淀-離心-魚精蛋白硫酸鹽。
魚精蛋白的純化:
分離提取后的魚精蛋白必須純化。利用魚精蛋白的電荷和分子大小,分別采用聚丙烯酰胺等電聚焦和凝膠過濾層析手段對提取的魚精蛋白粗提物進行純化。在聚丙烯酰胺等電聚焦過程中,因魚精蛋白是帶正電荷的堿性蛋白質,所以聚集于堿性端,而處在中、酸性區(qū)域的蛋白質條帶則為雜蛋白。聚丙烯酰胺等電聚焦完畢后,取膠板的堿性端,經擴散洗脫、透析除鹽,然后進行凝膠過濾層析。當魚精蛋白粗提物通過凝膠過濾柱時,溶液中的物質就按照不同分子量篩分開來,魚精蛋白分子小,能夠進入凝膠孔內,所以最后被洗脫出來。
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