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教您幾招,如何鑒別偽劣ELISA試劑盒

來(lái)源:上海滬震生物科技有限公司   2021年10月14日 14:00  

做實(shí)驗(yàn)最怕的是什么?

早起搶儀器?

熬夜寫(xiě)報(bào)告?

放假看文獻(xiàn)?


都不是!

最怕的是——

辛辛苦苦做了很久的實(shí)驗(yàn),

到最后才發(fā)現(xiàn)買的試劑盒居然是假的

那才叫一夜回到解放前


我們閱讀大量的文獻(xiàn)

精心設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課題

事無(wú)巨細(xì)的實(shí)驗(yàn)流程

這一切的努力就是為了

有一個(gè)滿意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

可是,每當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差

我們大都只會(huì)反復(fù)檢查樣品、模板、引物序列等

很少有人會(huì)質(zhì)疑購(gòu)買的試劑產(chǎn)品

尤其是那些進(jìn)口、的產(chǎn)品

然而,產(chǎn)品無(wú)處不在


在國(guó)內(nèi)生物研討蓬勃發(fā)展的如今,冒充無(wú)視科學(xué)研討的謹(jǐn)慎性和嚴(yán)肅性,讓廣闊的科研工作者被迫造假,嚴(yán)重破壞了科研空氣,擾亂了市場(chǎng)秩序,滬震生物整理了一些辨別這些偽劣ELISA試劑盒的辦法,供廣闊的科研工作者和用戶參考,讓期望對(duì)廣闊科研工作者有所協(xié)助。


事實(shí)上無(wú)論在國(guó)內(nèi)還是在國(guó)外,都會(huì)存在偽劣產(chǎn)品,我們要擦亮眼睛學(xué)會(huì)鑒別,假不亂真,假貨的出現(xiàn)和傳播也同樣有它的內(nèi)在規(guī)律,以下是假試劑常見(jiàn)的現(xiàn)象,希望大家以后盡量避免買到假貨。

常見(jiàn)現(xiàn)象


1.抗體的有效性用

重組蛋白生產(chǎn)的抗體不一定會(huì)和天然蛋白有效結(jié)合,必須用生物體中的蛋白去驗(yàn)證重組蛋白生產(chǎn)的看題的有效性;


2.稀釋真品

想摻水的假酒一樣,不良商家將一份抗體稀釋成五份銷售,使抗體效價(jià)下降,與說(shuō)明書(shū)標(biāo)注的嚴(yán)重不符,這是試劑造假中慣用的小伎倆;


3.進(jìn)口分裝

正規(guī)品牌為了保證產(chǎn)品質(zhì)量和品質(zhì)的穩(wěn)定性,不會(huì)搞出口分裝,因?yàn)樵噭┖兄性噭┒际且灰粚?duì)應(yīng)的,很難給分裝試劑的空間,如果是進(jìn)口分裝,十有八九是假貨;


4.濫竽充數(shù),以次充好

不法商販以一些來(lái)歷不明的試劑以次充好,瓶子是回收的,質(zhì)量無(wú)法保證,


5.無(wú)同源性指標(biāo)出現(xiàn)相似的標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值

兩個(gè)不同甚至沒(méi)有序列同源性的試劑盒,經(jīng)歷了交叉實(shí)驗(yàn)后,標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)值相似甚至相同,那么必定是假貨無(wú)疑了;


6.檢查種屬

用不同種屬的試劑盒替代,由于同一種蛋白有一定同源性,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性可能會(huì)差一點(diǎn)


7.替換指標(biāo),真假混賣

用TGFβ以假亂真,TGFβ是在大多數(shù)哺乳類動(dòng)物中廣泛表達(dá)的物質(zhì),其種屬間抗原的氨基酸序列同源性達(dá)到100%,但在實(shí)驗(yàn)中會(huì)隨其他因子影響而導(dǎo)致表達(dá)水平發(fā)生相應(yīng)變化,這些變化很難被察覺(jué),有了這些萬(wàn)能指標(biāo),公司就能以假亂真。

面對(duì)這一個(gè)假貨橫行的市場(chǎng),該如何鑒別ELISA試劑盒的真假?

采購(gòu)前




辦法一
向廠家索要或從其下載闡明書(shū),查找ELISA的性能目標(biāo):準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來(lái)說(shuō),除了校準(zhǔn)不一定每份闡明書(shū)都有外,其他的目標(biāo)一般都需求羅列(有些樣本需求高倍稀釋的,也許沒(méi)有準(zhǔn)確度這個(gè)目標(biāo))。假如無(wú)法供給這些性能目標(biāo),則闡明該試劑盒也許是假貨,或許試劑盒開(kāi)發(fā)進(jìn)程不行科學(xué)謹(jǐn)慎,有也許無(wú)法檢查出真實(shí)的樣本值。

辦法二
關(guān)于夸張ELISA包括的目標(biāo)的規(guī)模,尤其是不常見(jiàn)的種屬,可先到世界ELISA試劑盒供貨商上查找,假如查找不到該種屬的ELISA試劑盒,則有也許是假貨,需求小心翼翼。

辦法三
將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上查找,


采購(gòu)后




辦法一
查看闡明書(shū)、包裝盒的質(zhì)量,一般冒充偽劣產(chǎn)品為了降低成本,打印的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀闡明書(shū),如上所示查找ELISA的性能目標(biāo)。

辦法二

1.假如采購(gòu)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,使用穿插試驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是不是造假,辦法如下: 

(1) 取出采購(gòu)的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的規(guī)范品做規(guī)范曲線。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的規(guī)范品做規(guī)范曲線。

(4) 后續(xù)操作依照試劑盒闡明書(shū)進(jìn)行,加檢查抗體、酶復(fù)合物和底物。

(5) 試驗(yàn)結(jié)束后,檢查兩條規(guī)范曲線,假如兩條規(guī)范曲線共同則闡明兩個(gè)ELISA試劑盒檢查的同一個(gè)目標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。

(6) 假如兩條規(guī)范曲線不共同則闡明兩個(gè)ELISA試劑盒檢查的不一樣目標(biāo),試劑盒A只能檢查A,不能檢查B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。


2. 使用攪擾試驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是不是檢查意圖抗原,辦法如下: 

(1) 將對(duì)于試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢查抗體裝備成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后,替代原試劑盒中的檢查抗體

(3) 后續(xù)操作依照試劑盒闡明書(shū)進(jìn)行,加檢查抗體、酶復(fù)合物和底物

(4) 試驗(yàn)結(jié)束后,檢查其規(guī)范曲線,假如規(guī)范曲線良好則闡明參加的意圖抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢查抗體對(duì)于的對(duì)錯(cuò)意圖抗原,該試劑盒為偽劣編造ELISA試劑盒。

(5) 假如規(guī)范曲線無(wú)線性,則闡明試劑盒檢查抗體已被意圖抗原中和或攪擾,影響了其實(shí)踐試劑盒抗體的檢查效果,則該試劑盒檢查抗體對(duì)于的是意圖抗原。

偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者,他們往往唯利是圖,無(wú)視科學(xué)研究的嚴(yán)謹(jǐn)性和嚴(yán)肅性,讓廣大的科研工作者被動(dòng)造假,嚴(yán)重?cái)_亂了科研工作,



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