從外周血提取DNA是一個(gè)經(jīng)常遇到的問題，當(dāng)然可以用試劑盒提取，不過代價(jià)還是有點(diǎn)大，并且不方便，定試劑總要等上幾天，如果血液標(biāo)本不稀缺資源，不妨用一些簡便方法提取。

方法一

(1) 取抗凝血5ml在沉淀中加入15ml PBS，混勻，離心2000r/min10min。

(2) 將血漿轉(zhuǎn)至新的試管中，-70℃保存。

(3) 將血細(xì)胞轉(zhuǎn)入另一支試管中(10ml或50ml)加入盡可能多的冷的蒸餾水混勻。

(4) 將其插入冰內(nèi)5～10min或放入-20℃15min。

(5) 將上述混合液從冰中或-20℃取出放至室溫，離心2000r/min20min。

(6) 棄上清，收集沉淀。

(7) 在沉淀中加入15ml PBS，混勻，離心2000r/min10min。

此步驟重復(fù)3次至沉淀為淡紅色或白色。

(8) 將沉淀轉(zhuǎn)入小管，加少量PBS，每分鐘5000r/min離心5min，去上清。

(9)沉淀-70℃保存。

方法二 簡化鹽析法　

取抗凝血500μl ,加入細(xì)胞裂解液Ⅰ1 ml (10 mmol/ L Tris2HCl ;10 mmol/L KCl , 10 mmol/ L MgCl2 , 2 mmol/ L EDTA 和2. 5 % TritonX2100) 混勻,6 000 r/ min 離心5 min ,重復(fù)裂解一次,

加細(xì)胞裂解液Ⅱ150μl (10 mmol/ L Tris2HCl ; 10 mmol/ L KCl , 10 mmol/ L MgCl2 , 2mmol/ L EDTA 和1 %SDS) 混勻,56 ℃恒溫箱孵育15 min ;

加飽和NaCl 150μl ;混勻,10 000 r/ min 離心5 min ;

小心吸取水相,加2 倍體積的無水乙醇,輕輕混勻,12 000 r/ min 離心5 min ,

棄上清,待干,加50μl 無菌雙蒸水溶解DNA ,備用。

方法三

取EDTA - NaI 抗凝血100μl 加入1. 5 ml 離心管中,加入1000μl 無菌去離子水,輕輕顛倒5～10次,5 000 r/ min 離心3 min ,棄去上清液1000μl ,

加入6 mol/ L Nal100μl ,混旋10 s ,加200μl 氯仿∶異戊醇(24∶1) ,混旋30 s ,

10 000 r/ min 離心3 min ,取上清液150μl 于另一離心管中,

加入90μl 異丙醇,混勻后,10 000 r/ min 5 min ,棄去上清液, 加入1 000μl 75 %無水乙醇洗滌沉淀2 次,再加入1 000μl無水乙醇洗滌沉淀2 次,

沉淀置56 ℃烘干20 min ,加入50μl 無菌去離子水或50μl TE 溶液

個(gè)人體會：方法一較復(fù)雜，需要用蛋白酶K，方法三不能保證蛋白被*去除，將來影響試驗(yàn)，所以推薦方法二