離心機(jī)在微生物學(xué)診斷分離培育技術(shù)中的應(yīng)用
在微生物診斷中,離心機(jī)通常用于將被測(cè)微生物從被檢物料中分離出來(lái),并獲得純培養(yǎng)物(即單個(gè)微生物的培養(yǎng)物),因此,通常用離心機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行分離。微生物的離心分離培養(yǎng)方式是微生物學(xué)診斷中的一項(xiàng)重要基本操作。
分離單個(gè)微生物的方法很多:
1、將被檢物料接種在合適的微生物培養(yǎng)基中,然后從固體培養(yǎng)基表面產(chǎn)生的細(xì)菌中選擇一個(gè)待分離的細(xì)菌,并將其轉(zhuǎn)移到另一個(gè)合適的微生物培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。由于單個(gè)細(xì)菌體通常由單個(gè)細(xì)菌生成繁殖產(chǎn)生,因此培養(yǎng)的細(xì)菌是單一類型,即純培養(yǎng);
2、利用*的培養(yǎng)環(huán)境(如厭氧、二氧化碳環(huán)境等)進(jìn)行細(xì)菌分離;
將被檢物料接到子易患動(dòng)物身體內(nèi),使致病菌在動(dòng)物體內(nèi)繁殖,然后從動(dòng)物體內(nèi)取出物料用離心機(jī)離心分離出所需的成分,然后進(jìn)行培養(yǎng)。用對(duì)部分理化要素具有*抵抗力的細(xì)菌,用理化方法處理接種物料,殺死其他微生物,保留所需的細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)。
通常,可以用前兩種方法分離和培養(yǎng)被檢物料。如果被檢物料污染嚴(yán)重,可先用后兩種方法處理,然后再用前兩種方法進(jìn)行純培養(yǎng)。
在分離培養(yǎng)操作中,嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。所有用品、微生物培養(yǎng)基和試劑必須消毒,不能長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中,禁止用手觸摸或用嘴吹已殺菌的器皿內(nèi)部。
被檢物料中可能存在病原苗的特點(diǎn),選擇合適的微生物培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件:(溫度、氣體環(huán)境等)。對(duì)不明細(xì)菌進(jìn)行初步分離時(shí),最好多使用幾種微生物培養(yǎng)基,如肉湯、血瓊脂、麥康克瓊脂等,每種微生物培養(yǎng)基接種幾根試管,分別在普通環(huán)境和厭氧環(huán)境中培養(yǎng)。通過(guò)24-78小時(shí)觀察結(jié)果,但一些病原體需要在長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后才能生成。
被檢物料通常不需要處理,可以直接種植在微生物培養(yǎng)基上。當(dāng)懷疑為帶芽腦的病原苗時(shí),加入生理鹽水將被檢物料研磨成1:10的乳劑(液體物料不需要稀釋),放入60-80℃的水浴中20-30分鐘,殺死無(wú)芽胞的雜菌,然后接種在微生物培養(yǎng)基中。
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