Ni-IDA和Ni-NTA瓊脂糖凝膠的區(qū)別
根據(jù)結(jié)合基團(tuán)的不同,Ni2+親和層析柱可分為倆類:Ni-IDA瓊脂糖凝膠和Ni-NTA瓊脂糖
凝膠。Ni2+有六個(gè)螯合價(jià)位,其中Ni-IDA螯合了三價(jià),Ni-NTA螯合了四價(jià)。所以IDA的載量要比NTA的高,但其弱的結(jié)合力使金屬離子在洗脫階段時(shí)很容易浸出,與目的蛋白緊密結(jié)合,從而導(dǎo)致分離蛋白產(chǎn)量偏低,產(chǎn)品不純及金屬離子污染等問(wèn)題。而NTA的顆粒粒度均勻,粒徑更小,并且螯合鎳更穩(wěn)定,能耐受較高的還原劑,使填料更加穩(wěn)定,鎳離子不易脫落。
如果你追求高產(chǎn)量,而對(duì)蛋白純度的要求并不高,那么可以選用鎳IDA-瓊脂糖凝膠;如果對(duì)蛋白純度要求高的話,那么鎳NTA-瓊脂糖凝膠則是*。
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